小學(xué)語(yǔ)文的教學(xué)教案
發(fā)表時(shí)間:2020-11-16《微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)》教學(xué)設(shè)計(jì)。
一名優(yōu)秀的教師在教學(xué)時(shí)都會(huì)提前最好準(zhǔn)備,作為教師就要在上課前做好適合自己的教案。教案可以讓學(xué)生更好地進(jìn)入課堂環(huán)境中來(lái),幫助教師能夠井然有序的進(jìn)行教學(xué)。教案的內(nèi)容要寫(xiě)些什么更好呢?急您所急,小編為朋友們了收集和編輯了“《微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)》教學(xué)設(shè)計(jì)”,歡迎閱讀,希望您能夠喜歡并分享!
《微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)》教學(xué)設(shè)計(jì)課題名稱(chēng)課時(shí)數(shù)說(shuō)明微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)4配養(yǎng)基的基本知識(shí)及配制方法1;配制培養(yǎng)基及倒平板1;純化大腸桿菌和涂布接種1,觀察分析1分離土壤中分解尿素的細(xì)菌3基本原理及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1;樣品稀釋及涂布接種1;對(duì)菌落進(jìn)行統(tǒng)計(jì)及實(shí)驗(yàn)的分析與討論1;在第二和第三課時(shí)之間需要間隔2天時(shí)間分解纖維素的微生物的分離3基本原理及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1;樣品稀釋及涂布接種1;對(duì)菌落進(jìn)行統(tǒng)計(jì)及實(shí)驗(yàn)的分析與討論1;在第二和第三課時(shí)之間需要間隔2天時(shí)間提前準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)儀器、設(shè)備和藥品
課題名稱(chēng)實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備實(shí)驗(yàn)試劑或藥品說(shuō)明微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)培養(yǎng)皿、試管、錐形瓶、量筒、酒精燈、電子天秤、高壓蒸汽滅菌鍋、移液管、接種環(huán)、涂布器、恒溫箱、干熱滅菌箱、小鐵鏟等
牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、鹽酸、氫氧化鈉、瓊脂等干熱滅菌箱能夠迅速地將洗干凈的培養(yǎng)皿和試管烘干,小鐵鏟用于鏟土土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)除配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需物質(zhì)外,增加KH2PO4、NaHPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、酚紅等分解纖維素的微生物的分離除配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需物質(zhì)外,增加纖維素、NaNO3、Na2HPO47H2O、KH2PO4、KCl、酵母膏、水解酪素、CMC-Na(羧甲基纖維素鈉)、土豆汁、剛果紅等安排好教學(xué)班的實(shí)驗(yàn)順序
微生物實(shí)驗(yàn)涉及較多的實(shí)驗(yàn)儀器,而且實(shí)驗(yàn)時(shí)需要課內(nèi)和課外相結(jié)合,如實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)需要學(xué)生在課堂上完成兩項(xiàng)重要的操作步驟,一是配制培養(yǎng)基并倒平板;二是接種操作。平板滅菌工作由于需要較長(zhǎng)的時(shí)間,因此只能由教師在課間完成。為保證每位學(xué)生都能親手操作,保證各個(gè)教學(xué)班能在有限時(shí)間內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)任務(wù),教師要合理安排好教學(xué)班的實(shí)驗(yàn)順序。
做好課后的觀察與記錄
配制培養(yǎng)基和接種操作可以在課堂上完成,但接種后的平板放入培養(yǎng)箱中需要培養(yǎng)2~3天,這期間可安排生物科代表或部分小組長(zhǎng)進(jìn)行定期觀察,并做好計(jì)錄,以便及時(shí)讓其他學(xué)生觀察到自己的實(shí)驗(yàn)成果。特別需要說(shuō)明的是,如果學(xué)生不能及時(shí)觀察,培養(yǎng)的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),很多菌落就會(huì)聯(lián)成一片,計(jì)數(shù)時(shí)就無(wú)法做到準(zhǔn)確有效。
微生物的培養(yǎng)教學(xué)設(shè)計(jì)
教學(xué)目標(biāo):
(一)知識(shí)目標(biāo)網(wǎng)]
了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí);掌握培養(yǎng)基的制備、高壓蒸汽滅菌和平板劃線法等基本操作技術(shù)
(二)能力目標(biāo)
分析實(shí)驗(yàn)思路的確定和形成的原因,分析實(shí)驗(yàn)流程,對(duì)比前面的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),歸納共性,分析差異,增加印象
(三)情感目標(biāo)
形成勇于實(shí)踐、嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的科學(xué)態(tài)度和科學(xué)精神
教學(xué)重點(diǎn):無(wú)菌技術(shù)的操作
教學(xué)難點(diǎn):無(wú)菌技術(shù)的操作
教學(xué)過(guò)程:
(一)導(dǎo)入
美媒:中國(guó)嘗試用細(xì)菌吃掉大連港漏油
2010年7月29日新聞:上周中國(guó)北方大連港兩根輸油管發(fā)生爆炸后,北京一家生物科技公司提供了23噸吃油細(xì)菌,用于幫助清理港口周?chē)?83平方公里的浮油,此舉引起了廣泛關(guān)注。
微生物作畫(huà)1微生物作畫(huà)2
(二)具體過(guò)程
知識(shí)背景:
1培養(yǎng)基的種類(lèi)包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基等。
思考1:瓊脂的化學(xué)成分是什么?在配制培養(yǎng)基中時(shí)的作用是?
培養(yǎng)基的類(lèi)型及其應(yīng)用:
標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基類(lèi)型配制特點(diǎn)主要應(yīng)用物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基加入瓊脂較多菌種分離,鑒定,計(jì)數(shù)半固體培養(yǎng)基加入瓊脂較少菌種保存液體培養(yǎng)基不加入瓊脂工業(yè)生產(chǎn),連續(xù)培養(yǎng)化學(xué)組成合成培養(yǎng)基由已知成分配制而成,培養(yǎng)基成分明確菌種分類(lèi)、鑒定天然培養(yǎng)基由天然成分配制而成,培養(yǎng)基成分不明確工業(yè)生,產(chǎn)降低成本目的用途鑒別培養(yǎng)基添加某種指示劑或化學(xué)藥劑菌種的鑒別選擇培養(yǎng)基添加(或缺少)某種化學(xué)成分菌種的分離
2培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源四類(lèi)營(yíng)養(yǎng)成分。
思考2:從細(xì)胞的化學(xué)元素組成來(lái)看,培養(yǎng)基中為什么都含有這些營(yíng)養(yǎng)成分?
碳源:如CO2、糖類(lèi)、脂肪酸等有機(jī)物,構(gòu)成微生物的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和分泌物,并提供能量。
氮源:如N2、氨鹽、硝酸鹽、牛肉膏、蛋白胨等,主要用來(lái)合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮代謝物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作為碳源,又可以作為氮源,如氨基酸等。
3培養(yǎng)基除滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)的pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣等要求。
思考3:牛肉膏和蛋白胨主要為微生物提供什么營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)?
思考4:培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要添加什么物質(zhì)?
培養(yǎng)霉菌和細(xì)菌時(shí)分別需要怎樣調(diào)節(jié)pH?
生長(zhǎng)因子:某些微生物正常生長(zhǎng)代謝過(guò)程中必須從培養(yǎng)基中吸收的微量有機(jī)小分子,如某些氨基酸、堿基、維生素等。
閱讀無(wú)菌技術(shù),討論回答下列問(wèn)題:
4獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么?
5無(wú)菌技術(shù)包括哪些?
6比較消毒和滅菌(填表)
比較項(xiàng)理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強(qiáng)烈全部微生物能
思考5:無(wú)菌技術(shù)除了防止培養(yǎng)物被污染外,還具有的目的是?
7消毒方法:
(1)日常生活經(jīng)常用到的是煮沸消毒法;
(2)對(duì)一些不耐高溫的液體,則使用巴氏消毒法(作簡(jiǎn)要介紹);(3)對(duì)接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)首先噴灑石炭酸或煤酚皂等溶
液以增強(qiáng)消毒效果,然后使用紫外線進(jìn)行物理消毒。
(4)實(shí)驗(yàn)操作者的雙手使用酒精進(jìn)行消毒;
(5)飲水水源用氯氣進(jìn)行消毒。
8滅菌方法:
(1)接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;
(2)玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅
菌箱;
(3)培養(yǎng)基、無(wú)菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸
汽滅菌鍋。
(4)表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外
燈。
思考6:對(duì)接種環(huán)滅菌時(shí)要用酒精燈的哪一個(gè)層火焰灼燒可能伸入試管或培養(yǎng)皿的部位?
思考7:利用干熱滅菌箱對(duì)玻璃器皿滅菌時(shí)物品不能擺得太擠,目的
是什么?
思考8:物品裝入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后,要首先打開(kāi)排氣閥,煮沸并排除鍋內(nèi)冷空氣,其目的是?
培養(yǎng)基的配制原則:
①目的要明確
②營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)
③pH要適宜
實(shí)驗(yàn)操作
思考1:錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰的目的是什么?
思考2:倒平板的目的是?
思考3:若皿蓋和皿底之間粘有培養(yǎng)基,則該平板能否培養(yǎng)微生物?為什么?
思考4:配制斜面培養(yǎng)基中,試管要加塞棉塞的目的是?
思考5試管培養(yǎng)基形成斜面的作用是?
補(bǔ)充取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上的微生物;除第一次劃線外,其余劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上殘留菌種;取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進(jìn)行,其目的是防止高溫殺死菌種;最后灼燒接種環(huán)的目的是防止細(xì)菌污染環(huán)境和操作者。
在第1次劃線后都從上次劃線末端開(kāi)始的目的是獲得由單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。
稀釋涂布平板法:將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋?zhuān)⒉煌♂尪染悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí),即可獲得單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。
系列稀釋操作:
①取盛有9mL水的無(wú)菌試管6支,編號(hào)101、102、103、104、105、106。
②用灼燒冷卻的移液管吸取1mL菌液注入編號(hào)為101試管中,并吹打3次,使之混勻。
③從101倍液中吸取1mL菌液注入到編號(hào)為102試管內(nèi)吹打均勻,獲得102倍液。依此類(lèi)推。
結(jié)果分析與評(píng)價(jià)
1.培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是對(duì)照,若有菌落形成,說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌不徹底。
2.在肉湯培養(yǎng)基上,大腸桿菌菌落呈白色,為圓形,光滑有光澤,邊緣整齊。
3.培養(yǎng)12h和24h后的菌落大小不同(相同、不同);菌落分布位置相同(相同、不同)。原因是時(shí)間越長(zhǎng),菌落中細(xì)菌繁殖越多,菌落體積越大;菌落的位置不動(dòng),但菌落數(shù)增多。
思考1:在某培養(yǎng)基上出現(xiàn)了3種特征不同的菌落,原因有哪些?
思考2:頻繁使用的菌種利用臨時(shí)保藏法保存,長(zhǎng)期保存菌種的方法是甘油管藏法。前者利用固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)后,保存在4℃冰箱中,每3~6個(gè)月轉(zhuǎn)種培養(yǎng)一次,缺點(diǎn)是什么?后者將菌種與無(wú)菌體積等量混合后保存在多少度冷凍箱中?
(三)課堂總結(jié)、點(diǎn)評(píng)
課后探究
1、收集生活中與微生物有關(guān)的實(shí)例,并通過(guò)所學(xué)知識(shí)對(duì)其進(jìn)行
解釋
2、我們打針輸液時(shí),首先要用酒精擦拭針刺處,為什么?
相關(guān)知識(shí)
微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)導(dǎo)學(xué)案及練習(xí)題
一名優(yōu)秀的教師在教學(xué)方面無(wú)論做什么事都有計(jì)劃和準(zhǔn)備,作為高中教師就要好好準(zhǔn)備好一份教案課件。教案可以讓學(xué)生更容易聽(tīng)懂所講的內(nèi)容,幫助高中教師能夠井然有序的進(jìn)行教學(xué)。那么,你知道高中教案要怎么寫(xiě)呢?下面是小編精心為您整理的“微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)導(dǎo)學(xué)案及練習(xí)題”,僅供參考,大家一起來(lái)看看吧。
一、學(xué)習(xí)目標(biāo):
1.了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí)
2.掌握無(wú)菌操作技術(shù)
3.了解純化大腸桿菌的基礎(chǔ)知識(shí)
二、學(xué)習(xí)重點(diǎn)、難點(diǎn):
了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí);掌握無(wú)菌操作技術(shù)
三、學(xué)法指導(dǎo):小組交流合作一對(duì)一檢查通關(guān)
四、自主學(xué)習(xí)
一基礎(chǔ)知識(shí)
1.培養(yǎng)基
(1)培養(yǎng)基的種類(lèi)包括培養(yǎng)基和培養(yǎng)基等。
(2)培養(yǎng)基的化學(xué)成分一般都含有、、、四類(lèi)營(yíng)養(yǎng)成分,
(3)在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上,培養(yǎng)基還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)、以及等的要求。例如:培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加;培養(yǎng)霉菌時(shí)需要將培養(yǎng)基的PH調(diào)至;培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要將培養(yǎng)基的PH調(diào)至;培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)需要提供無(wú)氧的條件
2.無(wú)菌技術(shù)
(1)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。
避免雜菌污染的方法主要包括以下四個(gè)內(nèi)容:
①
②
③
④
(2)消毒是指
滅菌是指
(3)實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法是,此外,人們也常使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒,如用、等。常用的滅菌方法有、、,此外,實(shí)驗(yàn)室里還用或進(jìn)行消毒。
二實(shí)驗(yàn)操作
1.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基
(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟:
→→→→倒平板
(2)倒平板的過(guò)程
⑴培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50左右,才能用來(lái)倒平板。你用什么方法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?
⑵為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰?
⑶平板冷凝后,為什么要將平板倒置?
⑷在倒平板的過(guò)程中,如果不小心瘵培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎?為什么?
2.純化大腸桿菌
(1)微生物接種的方法中最常用的是和。
平板劃線法是指
。
稀釋涂布平板法是指
。
(2)平板劃線的操作步驟如下:
①
②
③
④
⑤
⑥
⑦
①為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?
②在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?
③在作第二次以及其后的劃線操作是赤什么總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線?
(3)系列稀釋操作步驟:
①
②
③
(4)涂布平板操作步驟:
①
②
③
④
選修一生物2.1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)學(xué)案(人教版)
俗話說(shuō),居安思危,思則有備,有備無(wú)患。教師在教學(xué)前就要準(zhǔn)備好教案,做好充分的準(zhǔn)備。教案可以讓學(xué)生們能夠更好的找到學(xué)習(xí)的樂(lè)趣,減輕教師們?cè)诮虒W(xué)時(shí)的教學(xué)壓力。教案的內(nèi)容具體要怎樣寫(xiě)呢?為此,小編從網(wǎng)絡(luò)上為大家精心整理了《選修一生物2.1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)學(xué)案(人教版)》,僅供您在工作和學(xué)習(xí)中參考。
課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)問(wèn)題導(dǎo)學(xué)
一、培養(yǎng)基和無(wú)菌技術(shù)
活動(dòng)與探究1
1.配制培養(yǎng)基所用的瓊脂的成分和作用是什么?
2.為什么有的微生物培養(yǎng)基中需加入特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)?
3.培養(yǎng)基是如何分類(lèi)的?
4.消毒和滅菌的原理、實(shí)質(zhì)相同嗎?
5.請(qǐng)判斷以下材料或用具是需要消毒還是滅菌。
(1)培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿。
(2)玻璃棒、試管、燒瓶和吸管。
(3)實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。
遷移與應(yīng)用1
滅菌的標(biāo)準(zhǔn)是()。
A.殺死所有的病原微生物
B.殺死物體表面所有的微生物
C.殺死所有的微生物,包括芽孢和孢子
D.使病原菌不生長(zhǎng)
1.培養(yǎng)基的類(lèi)型及應(yīng)用
標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基類(lèi)型配制特點(diǎn)主要應(yīng)用
物
理
性
質(zhì)固體培養(yǎng)基加入瓊脂較多菌種分離,
鑒定,計(jì)數(shù)
半固體培養(yǎng)基加入瓊脂較少菌種保藏
液體培養(yǎng)基不加入瓊脂工業(yè)生產(chǎn),
連續(xù)培養(yǎng)
化
學(xué)
成
分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明
確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)
合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確分類(lèi)鑒定
目
的
用
途鑒別培養(yǎng)基添加某種指示劑
或化學(xué)藥劑菌種的鑒別
選擇培養(yǎng)基添加(或缺少)
某種化學(xué)成分菌種的分離
注:培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是維持機(jī)體生命活動(dòng),保證生殖、發(fā)育所需的外源物質(zhì)。在人和動(dòng)物中,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括水、無(wú)機(jī)鹽、糖類(lèi)、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類(lèi);在植物中,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括礦質(zhì)元素、水、二氧化碳三類(lèi);微生物共有的營(yíng)養(yǎng)成分有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源,有些微生物還需要特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
2.實(shí)驗(yàn)室常用的消毒或滅菌方法
滅菌或消毒種類(lèi)主要方法應(yīng)用范圍
灼燒滅菌酒精燈火焰灼燒接種環(huán)、接種針及試管口等
干熱滅菌干熱滅菌箱內(nèi),在160~170℃下加熱1~2h玻璃器皿、金屬用具等
巴氏消毒70~75℃下煮30min牛奶、啤酒等一些不耐高溫的液體
高壓蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi),100kPa,121℃下持續(xù)加熱15~30min培養(yǎng)基等
紫外線消毒30W紫外線燈照射30min接種室空氣等
化學(xué)藥物消毒用體積分?jǐn)?shù)為70%~75%的乙醇、碘酒涂抹等用于皮膚、傷口、動(dòng)植物組織表面消毒,手術(shù)器械、玻璃器皿等消毒
二、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基
活動(dòng)與探究2
1.用流程圖表示該培養(yǎng)基的制備過(guò)程。
2.如果倒平板過(guò)程中,皿蓋和皿底之間粘有培養(yǎng)基,則該平板能否培養(yǎng)微生物?為什么?
3.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻至50℃左右時(shí),才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?
4.平板冷凝后,為什么要將平板倒置?
遷移與應(yīng)用2
關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,下列敘述錯(cuò)誤的是()。
A.操作順序?yàn)橛?jì)算、稱(chēng)量、溶化、倒平板、滅菌
B.將稱(chēng)好的牛肉膏連同稱(chēng)量紙一同放入燒杯
C.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板
D.待平板冷卻凝固約5~10分鐘后將平板倒過(guò)來(lái)放置
1.由于不同的微生物生長(zhǎng)對(duì)pH的需求不同,如培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基調(diào)至酸性,培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將培養(yǎng)基調(diào)至中性或微堿性,所以在培養(yǎng)基各組分溶化后需要先用酸或堿將pH調(diào)至微生物生長(zhǎng)的最適宜條件,再進(jìn)行滅菌處理。
2.培養(yǎng)基需要冷卻至50℃時(shí)才能開(kāi)始倒平板的原因:瓊脂是一種多糖,在98℃以上熔化,在44℃以下凝固,倒平板時(shí)高于50℃則會(huì)燙手,低于50℃時(shí)若不能及時(shí)操作,瓊脂會(huì)凝固。
三、純化大腸桿菌
活動(dòng)與探究3
1.純化大腸桿菌時(shí)需要接種,請(qǐng)列舉接種的技術(shù)并說(shuō)出它們共同的核心操作。
2.什么叫菌落?如何從“菌落”角度評(píng)價(jià)平板劃線法或稀釋涂布平板法的成功性?
3.學(xué)習(xí)教材第18頁(yè)平板劃線操作,思考下列問(wèn)題。
(1)為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?
(2)在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?
(3)平板劃線時(shí)不能劃破培養(yǎng)基的原因是什么?
4.學(xué)習(xí)教材第19頁(yè)稀釋涂布平板操作,思考下列問(wèn)題。
(1)稀釋涂布平板法的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線法與系列稀釋的無(wú)菌操作要求,想一想,第二步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作?
(2)操作結(jié)束后,為什么要將一個(gè)未接種的培養(yǎng)基和一個(gè)接種的培養(yǎng)基放在一起培養(yǎng)?
遷移與應(yīng)用3
下圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序?yàn)?→2→3→4→5。下列操作方法正確的是()。
A.只在操作前將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌
B.劃線操作須在火焰上進(jìn)行
C.在5區(qū)域中才可以得到所需菌落
D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌
1.接種方法的比較及分析
(1)平板劃線法:操作簡(jiǎn)單,但是單菌落不易分離。
(2)稀釋涂布平板法:操作復(fù)雜,但是單菌落易分離。
(3)稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中菌落的數(shù)目往往比實(shí)際數(shù)目低。這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。
2.結(jié)果評(píng)價(jià)
如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落在顏色、形狀、大小上基本一致,并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn),則說(shuō)明接種操作是符合要求的;如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則說(shuō)明接種過(guò)程中,無(wú)菌操作還未達(dá)到要求,需要分析原因,重新操作。
答案:
課前預(yù)習(xí)導(dǎo)學(xué)
一、1.生長(zhǎng)繁殖
2.(1)液體?。?)液體 瓊脂 瓊脂固體 固體 菌落
3.(1)水 碳源 氮 (2)pH 氧氣 維生素 酸性 中性 微堿 無(wú)氧
預(yù)習(xí)交流1:(1)提示:構(gòu)成細(xì)胞的基本元素有C、H、O、N4種,由此推測(cè)培養(yǎng)基應(yīng)含有提供C的物質(zhì)(碳源)、提供N的物質(zhì)(氮源)、提供H和O的物質(zhì)(H2O)。
(2)提示:還有P、S、K、Ca、Mg等,據(jù)此推測(cè)培養(yǎng)基中應(yīng)含有提供P、S、K、Ca、Mg等元素的物質(zhì)(無(wú)機(jī)鹽)。
(3)提示:自養(yǎng)微生物的碳源是含碳的無(wú)機(jī)物,主要是CO2、NaHCO3等,而異養(yǎng)微生物的碳源則是含碳的有機(jī)物,如糖類(lèi)、脂肪酸等。
二、1.外來(lái)雜菌
2.物理 化學(xué) 一部分 芽孢 孢子
3.理化因素 內(nèi)外 芽孢 孢子
4.(1)空間 衣著 手?。?)器皿 接種用具 培養(yǎng)基?。?)酒精燈火焰?。?)滅菌 周?chē)奈锲?br> 5.(1)巴氏消毒 (2)灼燒 (3)干熱?。?)100 121 15~30?。?)紫外線 化學(xué)藥物
預(yù)習(xí)交流2:(1)提示:被褥、鞋襪要常曬;肉制品儲(chǔ)存時(shí)用鹽腌等。
(2)提示:家畜閹割后,要在其傷口涂抹一些酒精或白酒;初冬楊樹(shù)樹(shù)干涂刷生石灰水等。
(3)提示:打針時(shí),注射部位要用酒精棉球擦洗;家畜閹割后,要在其傷口處涂抹一些酒精。
三、2.容易吸潮
3.瓊脂糊底
4.高壓蒸汽 干熱
5.50 酒精燈火焰
四、1.平板劃線法 稀釋涂布平板法
2.一個(gè) 子細(xì)胞群體
五、臨時(shí)保藏 甘油管藏
課堂合作探究
活動(dòng)與探究1:
1.提示:瓊脂是從紅藻中提取的多糖,在配制培養(yǎng)基時(shí)作為凝固劑。
2.提示:因?yàn)橛械奈⑸锶狈铣蛇@些物質(zhì)所需的酶或合成能力有限。
3.提示:按物理性質(zhì)分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基;按化學(xué)成分分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基;按用途分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。
4.提示:原理相同,都是使微生物的蛋白質(zhì)變性,借此殺死微生物;實(shí)質(zhì)不同,滅菌可殺死物體內(nèi)外的全部微生物(包括芽孢和孢子),而消毒僅殺死部分微生物。
5.提示:(1)(2)需要滅菌,(3)需要消毒。
遷移與應(yīng)用1:C 解析:滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
活動(dòng)與探究2:
1.提示:計(jì)算→稱(chēng)量→溶化→滅菌→倒平板
2.提示:不能。空氣中雜菌會(huì)在這些粘附培養(yǎng)基上繁殖,并污染皿內(nèi)培養(yǎng)基,因此,最好不要用這種平板培養(yǎng)微生物。
3.提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。
4.提示:平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。
遷移與應(yīng)用2:A 解析:制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌、倒平板,不能顛倒。牛肉膏容易吸潮,所以當(dāng)牛肉膏溶化并與稱(chēng)量紙分離后,用玻棒取出稱(chēng)量紙。待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右,用手觸摸錐形瓶剛剛不燙手,并且培養(yǎng)基處于溶化狀態(tài)時(shí)進(jìn)行倒平板。平板冷卻幾分鐘后還需倒置。
活動(dòng)與探究3:
1.提示:菌種的接種技術(shù)包括平板劃線操作、稀釋涂布平板操作、斜面接種、穿刺接種等,它們共同的核心操作是防止雜菌污染,保證培養(yǎng)物的純度。
2.提示:在培養(yǎng)基上由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體叫菌落。平板劃線法或稀釋涂布平板法如能在培養(yǎng)基上得到單個(gè)的菌落就是成功的。
3.(1)提示:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;以后每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端,從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到單菌落。劃線結(jié)束后需要灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免菌種污染環(huán)境和感染操作者。
(2)提示:以免接種環(huán)溫度太高殺死菌種。
(3)提示:一是劃破培養(yǎng)基會(huì)造成劃線不均勻,難以達(dá)到分離單菌落的目的;二是即使在劃破處有單個(gè)細(xì)胞,也無(wú)法形成規(guī)則的菌落,菌落會(huì)沿著劃破處生長(zhǎng),會(huì)形成一個(gè)條狀的菌落。
4.(1)提示:應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適,吸管頭不要接觸任何其他物體,吸管要在酒精燈火焰周?chē)取?br> (2)提示:培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是對(duì)照,未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1~2d后無(wú)菌落生長(zhǎng),說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的。若有菌落形成,說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌不徹底,或培養(yǎng)基被污染了,需要重新制備。
遷移與應(yīng)用3:D 解析:操作前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌;劃線操作須在火焰旁進(jìn)行,而不是火焰上;所有的劃線區(qū)都有可能得到所需菌落。
當(dāng)堂檢測(cè)
1.某培養(yǎng)基的配方表如下,下列敘述正確的是()。
成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊紅美藍(lán)蒸餾水
含量10g10g2g0.4g0.065g定容至1000mL
A.從物理性質(zhì)看該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基,從用途看該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基
B.培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨
C.該培養(yǎng)基缺少提供生長(zhǎng)因子的物質(zhì)
D.培養(yǎng)基調(diào)節(jié)好pH后就可以接種菌種
答案:B 解析:此配方中,葡萄糖主要作碳源,蛋白胨作氮源,同時(shí)還可提供生長(zhǎng)因子。從用途看該培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基。在調(diào)節(jié)好pH后還需滅菌,然后才可用于菌種的培養(yǎng)。
2.不同的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。但一般都需要水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。下列有關(guān)微生物所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的描述中,正確的是()。
A.氮源物質(zhì)只能為該微生物提供必要的氮元素
B.有些碳源也可以給微生物的生長(zhǎng)提供能源
C.無(wú)機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),所以無(wú)機(jī)鹽越多越好
D.固體培養(yǎng)基中不含水分
答案:B 解析:含氮的有機(jī)物既可給微生物提供氮元素,也可給微生物提供能源;含碳的有機(jī)物既可給微生物提供碳元素,也可給微生物提供能源。微生物生長(zhǎng)需要無(wú)機(jī)鹽,但不是越多越好,過(guò)多會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基滲透壓過(guò)高,使微生物因失水過(guò)多而不能生存。固體培養(yǎng)基中也含有水分,因?yàn)楹心虅┉傊猿使虘B(tài)。
3.關(guān)于滅菌和消毒的理解不正確的是()。
A.滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物,包括芽孢和孢子
B.消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是完全相同的
C.接種環(huán)用灼燒法滅菌
D.常用滅菌方法有灼燒法、干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法
答案:B 解析:消毒是使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子),滅菌則是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
4.下列有關(guān)平板劃線操作的說(shuō)法正確的是()。
A.使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿,操作過(guò)程中不再滅菌
B.打開(kāi)含菌種的試管需通過(guò)火焰滅菌,取出菌種后需馬上塞上棉塞
C.將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線即可
D.最后將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
答案:D 解析:使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿,操作過(guò)程中對(duì)接種環(huán)也要滅菌;含菌種的試管在打開(kāi)后和塞棉塞前都要通過(guò)酒精燈火焰滅菌;要分區(qū)域多次劃線,第二次劃線要從第一次劃線的末端開(kāi)始。
5.產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()。
A.一個(gè)細(xì)菌,液體培養(yǎng)基
B.許多細(xì)菌,液體培養(yǎng)基
C.一個(gè)細(xì)菌,固體培養(yǎng)基
D.許多細(xì)菌,固體培養(yǎng)基
答案:C 解析:菌落是由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體,因此標(biāo)準(zhǔn)菌落應(yīng)來(lái)源于最初的一個(gè)細(xì)菌。產(chǎn)生菌落的培養(yǎng)基不可能是液體培養(yǎng)基。
繪制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的制備及大腸桿菌純化的流程圖。
《微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用》學(xué)案
《微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用》學(xué)案
生物選修一第二章微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用教案
★課題目標(biāo)
(一)知識(shí)與技能
了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí);掌握培養(yǎng)基的制備、高壓蒸汽滅菌和平板劃線法等基本操作技術(shù)
(二)過(guò)程與方法
分析實(shí)驗(yàn)思路的確定和形成的原因,分析實(shí)驗(yàn)流程,對(duì)比前面的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),歸納共性,分析差異,增加印象
(三)情感、態(tài)度與價(jià)值觀
形成勇于實(shí)踐、嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的科學(xué)態(tài)度和科學(xué)精神
★課題重點(diǎn)
無(wú)菌技術(shù)的操作
★課題難點(diǎn)
無(wú)菌技術(shù)的操作
★教學(xué)方法
啟發(fā)式教學(xué)
★教學(xué)工具
多媒體課件
★教學(xué)過(guò)程
(一)引入新課
在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用中,都利用了微生物的發(fā)酵作用,其中的微生物來(lái)自于制作過(guò)程中的自然感染。而在工業(yè)化生產(chǎn)中,為了提高發(fā)酵的質(zhì)量,需要獲得優(yōu)良菌種,并保持發(fā)酵菌種的純度。這就要涉及到微生物的培養(yǎng)、分離、鑒別等基本技術(shù)。現(xiàn)在我們開(kāi)始學(xué)習(xí)微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用專(zhuān)題。
(二)進(jìn)行新課
1.基礎(chǔ)知識(shí)
1.1培養(yǎng)基的種類(lèi)包括固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基等。
〖思考1〗瓊脂是從紅藻中提取的多糖,在配制培養(yǎng)基中用作為凝固劑。
培養(yǎng)基的類(lèi)型及其應(yīng)用:
1.2培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源四類(lèi)營(yíng)養(yǎng)成分。
〖思考2〗從細(xì)胞的化學(xué)元素組成來(lái)看,培養(yǎng)基中為什么都含有這些營(yíng)養(yǎng)成分?
C、H、O、N、P、S是構(gòu)成細(xì)胞原生質(zhì)的基本元素,約占原生質(zhì)總量的97%以上。
碳源:如CO2、糖類(lèi)、脂肪酸等有機(jī)物,構(gòu)成微生物的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和分泌物,并提供能量。
氮源:如N2、氨鹽、硝酸鹽、牛肉膏、蛋白胨等,主要用來(lái)合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮代謝物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作為碳源,又可以作為氮源,如氨基酸等。
1.3培養(yǎng)基除滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)的pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣等要求。
生長(zhǎng)因子:某些微生物正常生長(zhǎng)代謝過(guò)程中必須從培養(yǎng)基中吸收的微量有機(jī)小分子,如某些氨基酸、堿基、維生素等。
〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要為微生物提供糖、維生素和有機(jī)氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
〖思考4〗培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要添加維生素,培養(yǎng)霉菌時(shí)需要將培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)為酸性,培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要將pH調(diào)節(jié)為中性或微堿性。
活動(dòng)2:閱讀“無(wú)菌技術(shù)”,討論回答下列問(wèn)題:
1.4獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵。
1.5無(wú)菌技術(shù)包括:
(1)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒;
(2)將培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌;
(3)為避免周?chē)⑸镂廴?,?shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近旁進(jìn)行;
(4)避免已滅菌處理的材料用具與周?chē)锲废嘟佑|。
1.6比較消毒和滅菌(填表)
〖思考5〗無(wú)菌技術(shù)除了防止培養(yǎng)物被污染外,還具有的目的是防止感染實(shí)驗(yàn)操作者。
1.7消毒方法:
(1)日常生活經(jīng)常用到的是煮沸消毒法;
(2)對(duì)一些不耐高溫的液體,則使用巴氏消毒法(作簡(jiǎn)要介紹);
(3)對(duì)接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)首先噴灑石炭酸或煤酚皂等溶液以增強(qiáng)消毒效果,然后使用紫外線進(jìn)行物理消毒。
(4)實(shí)驗(yàn)操作者的雙手使用酒精進(jìn)行消毒;
(5)飲水水源用氯氣進(jìn)行消毒。
1.8滅菌方法:
(1)接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;
(2)玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;
(3)培養(yǎng)基、無(wú)菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。
(4)表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。
〖思考6〗對(duì)接種環(huán)滅菌時(shí)要用酒精燈的充分燃燒層火焰灼燒可能伸入試管或培養(yǎng)皿的部位。
〖思考7〗利用干熱滅菌箱對(duì)玻璃器皿滅菌時(shí)物品不能擺得太擠,目的是避免妨礙熱空氣流通。
〖思考8〗物品裝入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后,要首先打開(kāi)排氣閥,煮沸并排除鍋內(nèi)冷空氣,其目的是有利于鍋內(nèi)溫度升高;隨后關(guān)閉排氣閥繼續(xù)加熱,氣壓升至100kPa,溫度為121℃,并維持15~30min;最后切斷熱源,使溫度自然降溫,氣壓務(wù)必降至零時(shí)打開(kāi)鍋蓋,其目的是防止容器中的液體暴沸。
培養(yǎng)基的配制原則:
①目的要明確:根據(jù)培養(yǎng)的微生物種類(lèi)、培養(yǎng)的目的等確定培養(yǎng)基的類(lèi)型和配制量。
②營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào):培養(yǎng)基中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例要適宜。例如:碳氮比4∶1時(shí),谷氨酸棒狀桿菌大量繁殖而產(chǎn)生谷氨酸少;碳氮比為3∶1時(shí),菌體繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。
③pH要適宜:細(xì)菌培養(yǎng)基pH中性或偏堿性,霉菌培養(yǎng)基呈酸性。
2.實(shí)驗(yàn)操作
2.1計(jì)算:根據(jù)配方比例,計(jì)算100mL培養(yǎng)基各成分用量。
2.2稱(chēng)量:準(zhǔn)確稱(chēng)取各成分。稱(chēng)取牛肉膏和蛋白胨時(shí)動(dòng)作要迅速,目的是防止牛肉膏吸收空氣中水分。
2.3溶化:①加水加熱熔化牛肉膏;②加入蛋白胨和氯化鈉繼續(xù)加熱;③加入瓊脂;④用蒸餾水定容到100mL。整個(gè)過(guò)程不斷用玻棒攪拌,目的是防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂。
2.4調(diào)pH:用1mol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)pH至偏堿性。
2.5滅菌:將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中,加塞包扎后用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌;所用培養(yǎng)皿用報(bào)紙包扎后用干熱滅菌箱滅菌。
2.6倒平板:待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)在酒精燈火焰附近操作進(jìn)行。
其過(guò)程是:
①在火焰旁右手拿錐形瓶,左手拔出棉塞;
②右手拿錐形瓶,使錐形瓶的瓶口迅速通過(guò)火焰;
③左手將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條縫隙,右手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,立刻蓋上皿蓋。
④待平板冷卻凝固后,將平板倒過(guò)來(lái)放置。
〖思考1〗錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰的目的是消滅瓶口的雜菌,防止雜菌感染培養(yǎng)基。
〖思考2〗倒平板的目的是防止培養(yǎng)基冷卻過(guò)程中形成的水滴落到培養(yǎng)基表面。
〖思考3〗若皿蓋和皿底之間粘有培養(yǎng)基,則該平板能否培養(yǎng)微生物?為什么?
不能??諝庵须s菌會(huì)在這些粘附培養(yǎng)基上繁殖,并污染皿內(nèi)培養(yǎng)基。
〖思考4〗配制斜面培養(yǎng)基中,試管要加塞棉塞的目的是保持通氣并防止雜菌感染。
〖思考5〗試管培養(yǎng)基形成斜面的作用是增大接種面積。
2.7接種
2.7.1微生物接種的最常用方法是平板劃線法和稀釋涂布法,另外還有穿刺接種和斜面接種等。
2.7.2平板劃線法:通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。其操作步驟是:
①將接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒直至燒紅。
②在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán),并打開(kāi)大腸桿菌的菌種試管的棉塞。
③將菌種試管口通過(guò)火焰達(dá)到消滅試管口雜菌的目的。
④將冷卻的接種環(huán)伸入到菌液中取出一環(huán)菌種。
⑤將菌種試管口再次通過(guò)火焰后塞上棉塞。
⑥將皿蓋打開(kāi)一條縫隙,把接種環(huán)伸入平板內(nèi)劃3~5條平行線,蓋上皿蓋,不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基。
⑦灼燒接種環(huán),冷卻后從第一區(qū)劃線末端開(kāi)始向第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)上述過(guò)程,完成三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將第五區(qū)的劃線與第一區(qū)劃線相連。
⑧將平板倒置放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
〖思考6〗取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上的微生物;除第一次劃線外,其余劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上殘留菌種;取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進(jìn)行,其目的是防止高溫殺死菌種;最后灼燒接種環(huán)的目的是防止細(xì)菌污染環(huán)境和操作者。
〖思考7〗在第1次劃線后都從上次劃線末端開(kāi)始的目的是獲得由單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。
2.7.3 稀釋涂布平板法:將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋?zhuān)⒉煌♂尪染悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí),即可獲得單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。
2.7.4 系列稀釋操作:
①取盛有9mL水的無(wú)菌試管6支,編號(hào)101、102、103、104、105、106。
②用灼燒冷卻的移液管吸取1mL菌液注入編號(hào)為101試管中,并吹打3次,使之混勻。
③從101倍液中吸取1mL菌液注入到編號(hào)為102試管內(nèi)吹打均勻,獲得102倍液。依此類(lèi)推。
〖思考8〗操作中試管口和移液管應(yīng)在離火焰1~2cm處。整個(gè)操作過(guò)程中使用了1支移液管。
3.結(jié)果分析與評(píng)價(jià)
3.1 培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是對(duì)照,若有菌落形成,說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌不徹底。
3.2 在肉湯培養(yǎng)基上,大腸桿菌菌落呈白色,為圓形,光滑有光澤,邊緣整齊。
3.3 培養(yǎng)12h和24h后的菌落大小不同(相同、不同);菌落分布位置相同(相同、不同)。原因是時(shí)間越長(zhǎng),菌落中細(xì)菌繁殖越多,菌落體積越大;菌落的位置不動(dòng),但菌落數(shù)增多。
〖思考9〗在某培養(yǎng)基上出現(xiàn)了3種特征不同的菌落,原因有培養(yǎng)基滅菌不徹底或雜菌感染等。
〖思考10〗頻繁使用的菌種利用臨時(shí)保藏法保存,長(zhǎng)期保存菌種的方法是甘油管藏法。前者利用固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)后,保存在4℃冰箱中,每3~6個(gè)月轉(zhuǎn)種培養(yǎng)一次,缺點(diǎn)是保存時(shí)間較短,容易發(fā)生污染和變異;后者將菌種與無(wú)菌體積等量混合后保存在-20℃冷凍箱中。
(三)課堂總結(jié)、點(diǎn)評(píng)
(四)實(shí)例探究
例1.關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中,正確的是
A.是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源B.凡碳源都提供能量
C.除水以外的無(wú)機(jī)物只提供無(wú)機(jī)鹽D.無(wú)機(jī)氮源也能提供能量
解析:不同的微生物,所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有較大差別,要針對(duì)微生物的具體情況分析。對(duì)于A、B選項(xiàng),它的表達(dá)是不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;有的碳源可同時(shí)是氮源,如NH4HCO3;有的碳源同時(shí)是能源,如葡萄糖;有的碳源同時(shí)是氮源,也是能源,如蛋白胨。對(duì)于C選項(xiàng),除水以外的無(wú)機(jī)物種類(lèi)繁多,功能也多樣。如二氧化碳,可作為自養(yǎng)型微生物的碳源;NaHCO3,可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和無(wú)機(jī)鹽;而NaCl則只能提供無(wú)機(jī)鹽。對(duì)于D選項(xiàng),無(wú)機(jī)氮源提供能量的情況還是存在的,如NH3可為硝化細(xì)菌提供能量和氮源。
答案:D
例2.下面對(duì)發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是
A.防止雜菌污染B.消滅雜菌
C.培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌D.滅菌必須在接種前
解析:滅菌是微生物發(fā)酵過(guò)程的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。A說(shuō)的是滅菌的目的,因?yàn)榘l(fā)酵所用的菌種大多是單一的純種,整個(gè)發(fā)酵過(guò)程不能混入其他微生物(雜菌),所以是正確的;B是錯(cuò)誤的,因?yàn)闇缇哪康氖欠乐闺s菌污染,但實(shí)際操作中不可能只消滅雜菌,而是消滅全部微生物。C是正確的,因?yàn)榕c發(fā)酵有關(guān)的所有設(shè)備和物質(zhì)都要滅菌;發(fā)酵所用的微生物是滅菌后專(zhuān)門(mén)接種的,滅菌必須在接種前,如果接種后再滅菌就會(huì)把所接菌種也殺死。
答案:B
☆綜合應(yīng)用
例3.右表是某微生物培養(yǎng)基成分,請(qǐng)據(jù)此回答:
編號(hào)成分含量
①粉狀硫10g
②(NH4)2SO40.4g
③K2HPO44.0g
④MgSO49.25g
⑤FeSO40.5g
⑥CaCl20.5g
⑦H2O100ml
(1)右表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類(lèi)型
是。
(2)若不慎將過(guò)量NaCl加入培養(yǎng)基中。
如不想浪費(fèi)此培養(yǎng)基,可再加入,
用于培養(yǎng)。
(3)若除去成分②,加入(CH2O),該培
養(yǎng)基可用于培養(yǎng)。
(4)表中營(yíng)養(yǎng)成分共有類(lèi)。
(5)不論何種培養(yǎng)基,在各種成分都溶化
后分裝前,要進(jìn)行的是。
(6)右表中各成分重量確定的原則是。
(7)若右表培養(yǎng)基用于菌種鑒定,應(yīng)該增加的成分是。
解析:對(duì)于一個(gè)培養(yǎng)基,它能培養(yǎng)何種微生物,要看它的化學(xué)成分。當(dāng)然這只適用于合成培養(yǎng)基,如果是一個(gè)天然培養(yǎng)基就不能從培養(yǎng)基的成分上區(qū)分它是培養(yǎng)何種微生物的。分析化學(xué)成分要從營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的類(lèi)型出發(fā)。右表中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有水、無(wú)機(jī)鹽、氮源三類(lèi),缺乏碳源和特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。對(duì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),有的微生物是不需要的,但沒(méi)有微生物是不需要碳源的。該培養(yǎng)基中沒(méi)有碳源,說(shuō)明培養(yǎng)的微生物是從空氣中獲得碳源的,即可培養(yǎng)的微生物就是自養(yǎng)型微生物了。該培養(yǎng)基中加入了過(guò)量食鹽,就可以成為金黃色葡萄球菌鑒別培養(yǎng)基,但金黃色葡萄球菌是異養(yǎng)型微生物,這個(gè)培養(yǎng)基就還需要加入有機(jī)碳源。該培養(yǎng)基若加入(CH2O),培養(yǎng)基中就有了碳源,但除去成分②,卻使培養(yǎng)基中沒(méi)有了氮源,這時(shí)就只能用于培養(yǎng)固氮微生物了。對(duì)于菌種鑒定,往往用的是固體培養(yǎng)基,而表中沒(méi)有凝固劑,需要加入常見(jiàn)的凝固劑——瓊脂。
答案:⑴自養(yǎng)型微生物⑵含碳有機(jī)物金黃色葡萄球菌⑶固氮微生物⑷3⑸調(diào)整pH⑹依微生物的生長(zhǎng)需要確定⑺瓊脂(或凝固劑)
(五)鞏固練習(xí)
1.不可能作為異養(yǎng)微生物碳源的是
A.牛肉膏B.含碳有機(jī)物C.石油D.含碳無(wú)機(jī)物
2.根瘤菌能利用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的組別是
A.NH3,(CH2O),NaClB.N2,(CH2O),CaCl2
C.銨鹽,CO2,NaClD.NO2,CO2,CaCl2
3.配制培養(yǎng)基的敘述中正確的是
A.制作固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂B.加入青霉素可得到放線菌
C.培養(yǎng)自生固氮菌不需氮源D.發(fā)酵工程一般用半固體培養(yǎng)基
4.自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別是
A.碳源B.氮源C.無(wú)機(jī)鹽D.特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
5.下表是有關(guān)4種生物的能源、碳源、氮源和代謝類(lèi)型的概述。其中正確的是()
生物硝化細(xì)菌根瘤菌酵母菌谷氨酸棒狀桿菌
能源氧化NH3N2的固定分解糖類(lèi)等有機(jī)物光能
碳源C02糖類(lèi)糖類(lèi)糖類(lèi)
氮源NH3N2NH4+、NO3-尿素
代謝類(lèi)型自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)兼性厭氧型自養(yǎng)需氧型
A.根瘤菌、谷氨酸棒狀桿菌B.硝化細(xì)菌、酵母菌
C.酵母菌、谷氨酸棒狀桿菌D.硝化細(xì)菌、根瘤菌
6.甲、乙、丙是三種微生物,下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來(lái)培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ種正常生長(zhǎng)繁殖;甲能在Ⅰ中正常生長(zhǎng)繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生長(zhǎng)繁殖,甲、丙都不能。下列說(shuō)法正確的是()
粉狀硫
10gK2HPO4
4gFeSO4
0.5g蔗糖
10g(NH4)2SO4
0.4gH2O
100mlMgSO4
9.25gCaCl2
0.5g
Ⅰ++++-+++
Ⅱ+++-++++
Ⅲ++++++++
A、甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物
B、甲、乙、丙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物
C、甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物
D、甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物
7.微生物(除病毒外)需要從外界吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并通過(guò)代謝來(lái)維持正常的生長(zhǎng)和繁殖。下列有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)的說(shuō)法正確的是
A.乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的
B.微生物生長(zhǎng)中不可缺少的一些微量的無(wú)機(jī)物稱(chēng)為生長(zhǎng)因子
C.培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高對(duì)微生物的增殖越有利
D.生長(zhǎng)因子一般是酶或核酸的組成成分,微生物本身合成這些生長(zhǎng)因子的能力往往不足。
8.某一種細(xì)菌株要從環(huán)境中提取現(xiàn)成的亮氨酸(20種氨基酸中的一種)才能生長(zhǎng),此菌株對(duì)鏈霉素敏感。實(shí)驗(yàn)者用誘變劑處理此菌株,想篩選出表中細(xì)菌菌株類(lèi)型。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)昴康?,選用的培養(yǎng)基類(lèi)型是()
注:L—亮氨酸S—鏈霉素“+”—加入“—”—不加入
如:L—:不加亮氨酸S+:加入鏈霉素
選項(xiàng)篩選出不需要亮氨酸的菌株篩選出抗鏈霉素的菌株篩選出不需要亮氨酸的抗鏈霉素的菌株
AL+S+L—S—L+S-
BL-S—L+S+L—S+
CL—S+L+S+L—S—
DL+S—l—S—L+S+
9.要將從土壤中提取的自生固氮菌與其他的細(xì)菌分離出來(lái),應(yīng)將它們接種在
A.加入氮源和殺菌劑的培養(yǎng)基上B.不加入氮源和不加殺菌劑的培養(yǎng)基上
C.加入氮源,不加殺菌劑的培養(yǎng)基上D.不含氮源和殺菌劑的培養(yǎng)基上
10.酵母菌培養(yǎng)液中常含有一定濃度的葡萄糖,但當(dāng)葡萄糖濃度過(guò)高時(shí),反而抑制微生物的生長(zhǎng),原因是
A.碳源供應(yīng)太充足B.細(xì)胞會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離
C.改變了酵母菌的pH值D.葡萄糖不是酵母菌的原料
答案:DACACCDBBB
★課余作業(yè)
1、收集生活中與微生物有關(guān)的實(shí)例,并通過(guò)所學(xué)知識(shí)對(duì)其進(jìn)行解釋
2、我們打針輸液時(shí),首先要用酒精擦拭針刺處,為什么?
★教學(xué)體會(huì)
本節(jié)課可以通過(guò)生產(chǎn)實(shí)例導(dǎo)入,使學(xué)生認(rèn)識(shí)在微生物的培養(yǎng)過(guò)程中,保持培養(yǎng)物純凈的重要性。在課堂上可以跳出教材,充分發(fā)揮學(xué)生的主動(dòng)性,讓學(xué)生收集列舉更多的生產(chǎn)生活中的實(shí)例,從中體會(huì)培養(yǎng)物純凈的重要性。當(dāng)時(shí)由于微生物的微觀性和危害性,一定要教育學(xué)生培養(yǎng)良好的衛(wèi)生習(xí)慣。
★資料袋
微生物的特點(diǎn)
1.個(gè)體微小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單
在形態(tài)上,個(gè)體微小,肉眼看不見(jiàn),需用顯微鏡觀察,細(xì)胞大小以微米和納米計(jì)量。
2.繁殖快
生長(zhǎng)繁殖快,在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)條件下細(xì)菌幾十分鐘至幾小時(shí)可以繁殖一代。
3.代謝類(lèi)型多,活性強(qiáng)。
4.分布廣泛
有高等生物的地方均有微生物生活,動(dòng)植物不能生活的極端環(huán)境也有微生物存在。
5.數(shù)量多
在局部環(huán)境中數(shù)量眾多,如每克土壤含微生物幾千萬(wàn)至幾億個(gè)。
6.易變異
相對(duì)于高等生物而言,較容易發(fā)生變異。在所有生物類(lèi)群中,已知微生物種類(lèi)的數(shù)量?jī)H次于被子植物和昆蟲(chóng)。微生物種內(nèi)的遺傳多樣性非常豐富。
所以微生物是很好的研究對(duì)象,具有廣泛的用途。
微生物的營(yíng)養(yǎng)
一位優(yōu)秀的教師不打無(wú)準(zhǔn)備之仗,會(huì)提前做好準(zhǔn)備,教師在教學(xué)前就要準(zhǔn)備好教案,做好充分的準(zhǔn)備。教案可以讓學(xué)生更好地進(jìn)入課堂環(huán)境中來(lái),幫助教師更好的完成實(shí)現(xiàn)教學(xué)目標(biāo)。怎么才能讓教案寫(xiě)的更加全面呢?以下是小編收集整理的“微生物的營(yíng)養(yǎng)”,僅供參考,大家一起來(lái)看看吧。
選修本
第17課時(shí)微生物的營(yíng)養(yǎng)
一、微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分為、、、和五大類(lèi)。
(1)碳源——無(wú)機(jī)碳源如:;有機(jī)碳源如:。
(2)氮源——無(wú)機(jī)氮源如:;有機(jī)氮源如:。
(3)生長(zhǎng)因子——主要包括、、等。
二、培養(yǎng)基的配制原則:1.2.3.
三、培養(yǎng)基的種類(lèi)
1.根據(jù)物理性質(zhì):
種類(lèi)是否含凝固劑用途
固體培養(yǎng)基
半固體培養(yǎng)基
液體培養(yǎng)基
2.根據(jù)化學(xué)成分:
種類(lèi)化學(xué)成分是否明確用途
合成培養(yǎng)基
天然培養(yǎng)基
編號(hào)成分含量
①粉狀硫10.00g
②(NH4)2SO40.40g
③K2HPO44.0g
④MgSO49.25g
⑤FeSO40.50g
⑥CaCl20.50g
⑦H2O100ml
3.根據(jù)用途
種類(lèi)制備方法原理用途實(shí)例
選擇培養(yǎng)基
鑒定培養(yǎng)基
右表是某微牛物培養(yǎng)液成分。請(qǐng)據(jù)此回答:
(1)右表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類(lèi)型是;
(2)若不慎將過(guò)量NaCl加入培養(yǎng)基中,如不想浪費(fèi)此培養(yǎng)基,可再加入,用于培養(yǎng);
(3)若除去成分②,加入(CH20),該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng);
(4)表中營(yíng)養(yǎng)成分共有類(lèi);
(5)不論何種培養(yǎng)基,在各種成分都溶化后分裝前,要進(jìn)行的是;(6)右表中各成分重量確定的原則是;
(7)若右表培養(yǎng)基用于菌種鑒定,應(yīng)該增加的成分是。
答案:⑴自養(yǎng)微生物⑵含碳有機(jī)物金黃色葡萄球菌⑶固氮微生物⑷3⑸調(diào)整PH值⑹依微生物的生長(zhǎng)需要確定⑺瓊脂(或凝固劑)
一、選擇題
1.下列物質(zhì)中,能為根瘤提供碳源、氮源的
A.大豆粉和蛋白?。拢瓹O2和N2?。茫咸烟呛蚇2D.碳酸鹽和NH3
2.下列關(guān)于生長(zhǎng)因子的敘述不正確的是
?。粒L(zhǎng)因子是指微生物生長(zhǎng)不可缺少的微量有機(jī)物
?。拢话闶敲?、核酸的組成部分
?。茫陨聿荒芎铣?,必須由外界補(bǔ)充
?。模饕ňS生素、氨基酸和堿基等
3.對(duì)下列培養(yǎng)基的敘述正確的是
?。粒谱鞴腆w培養(yǎng)基必須加入瓊脂?。拢尤肭嗝顾乜傻玫椒啪€菌
?。茫囵B(yǎng)自生固氮菌不需氮源 D.發(fā)酵工程一般用半固體培養(yǎng)基
4.要從多種細(xì)菌中分離某種細(xì)菌,培養(yǎng)基要用
?。粒腆w培養(yǎng)基 B.液體培養(yǎng)基
?。茫尤肭嗝顾氐呐囵B(yǎng)基?。模尤敫邼舛仁雏}的培養(yǎng)基
二、非選擇題
5.下表是一種培養(yǎng)基的配方。請(qǐng)回答:
牛肉膏0.5g
蛋白胨1g
NaCl0.5g
瓊脂2g
水200mL
(1)此培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)要素有類(lèi),其中蛋白胨能提供的是。
(2)各成分重量確定的原則是。
(3)在各種成分溶化后分裝前,須進(jìn)行的是。
(4)該培養(yǎng)基依物理性質(zhì)劃分屬于培養(yǎng)基,能培養(yǎng)的細(xì)菌代謝類(lèi)型是。
(5)如要鑒別自來(lái)水中的大腸桿菌是否超標(biāo),需加入。觀察它的。
(6)此培養(yǎng)基能否用于培養(yǎng)產(chǎn)生人的生長(zhǎng)激素的工程菌?。原因是。
(7)若有幾種雜菌混合在一起,可采用什么方法將它們分離?。若細(xì)菌中混雜有酵母菌,要將酵母菌分離出來(lái),可采用。
自我評(píng)價(jià)答案
1C2C3C4A5(1)五碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、能源(2)根據(jù)所培養(yǎng)微生物的營(yíng)養(yǎng)需要(3)調(diào)節(jié)PH值(4)固體異養(yǎng)型(5)伊紅——美藍(lán)菌落(6)不能工業(yè)生產(chǎn)常使用液體培養(yǎng)基(7)在固體培養(yǎng)基上用劃線法或稀釋后用點(diǎn)接法在選擇培養(yǎng)基中加入青霉素