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《酵母細(xì)胞的固定化》教學(xué)設(shè)計(jì)。

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選修一生物4.3酵母細(xì)胞的固定化學(xué)案（人教版）

作為優(yōu)秀的教學(xué)工作者，在教學(xué)時(shí)能夠胸有成竹，教師要準(zhǔn)備好教案，這是老師職責(zé)的一部分。教案可以讓學(xué)生更好地進(jìn)入課堂環(huán)境中來，使教師有一個(gè)簡(jiǎn)單易懂的教學(xué)思路。那么如何寫好我們的教案呢？下面是小編精心為您整理的“選修一生物4.3酵母細(xì)胞的固定化學(xué)案（人教版）”，相信您能找到對(duì)自己有用的內(nèi)容。

課題3　酵母細(xì)胞的固定化
1．說出固定化酶和固定化細(xì)胞的作用和原理。
2．嘗試制備固定化酵母細(xì)胞，并利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行酒精發(fā)酵。
一、固定化酶的應(yīng)用實(shí)例
1．高果糖漿的生產(chǎn)需要使用______________，它能將葡萄糖轉(zhuǎn)化成果糖。這種酶的________好，可以持續(xù)發(fā)揮作用。但是，酶溶解于葡萄糖溶液后，就無法從糖漿中回收，造成很大的浪費(fèi)。
2．葡萄糖異構(gòu)酶固定：將酶固定在一種顆粒狀的______上，再將這些酶顆粒裝到一個(gè)________內(nèi)，柱子底端裝上分布著許多小孔的______。酶顆粒無法通過篩板上的小孔，而反應(yīng)溶液卻可以自由出入。
3．高果糖漿的生產(chǎn)操作：生產(chǎn)過程中，將____________從反應(yīng)柱的上端注入，使其流過反應(yīng)柱，與______________接觸，轉(zhuǎn)化成果糖，從反應(yīng)柱的下端流出。
二、固定化技術(shù)的方法
1．固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用______或______方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。一般來說，酶更適合采用__________和__________法固定化，而細(xì)胞多采用______法固定化。這是因?yàn)榧?xì)胞個(gè)大，而酶分子很?。粋€(gè)大的細(xì)胞難以被______或______，而個(gè)小的酶容易從__________中漏出。
2．包埋法固定化細(xì)胞即將微生物細(xì)胞均勻地包埋在不溶于水的____________中。常用的載體有______、________、海藻酸鈉、____________和____________等。
三、實(shí)驗(yàn)操作
1．酵母細(xì)胞的活化
在缺水的狀態(tài)下，微生物會(huì)處于休眠狀態(tài)。活化就是讓處于______狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。
2．配制物質(zhì)的量濃度為0.05molL－1的CaCl2溶液
3．配制海藻酸鈉溶液
配制海藻酸鈉溶液時(shí)要用酒精燈加熱，邊加熱邊______，加熱時(shí)要用______，或者_(dá)_________，直至完全溶化。
4．海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合
將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，再加入已活化的酵母細(xì)胞，進(jìn)行充分?jǐn)嚢瑁蛊浠旌暇鶆?，再轉(zhuǎn)移至注射器中。
5．固定化酵母細(xì)胞
以______的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的________溶液中，形成凝膠珠狀，將這些凝膠珠在CaCl2溶液中浸泡____min左右。
6．將固定好的酵母細(xì)胞（凝膠珠）用蒸餾水沖洗2～3次，放入用于發(fā)酵的葡萄糖溶液中，再置于25℃下發(fā)酵24h后，會(huì)發(fā)現(xiàn)有氣泡產(chǎn)生，同時(shí)有酒味散發(fā)。
工業(yè)生產(chǎn)中，細(xì)胞的固定化是在__________的條件下進(jìn)行的。

答案：一、1.葡萄糖異構(gòu)酶　穩(wěn)定性
2．載體　反應(yīng)柱　篩板
3．葡萄糖溶液　葡萄糖異構(gòu)酶
二、1.物理　化學(xué)　化學(xué)結(jié)合　物理吸附　包埋　吸附　結(jié)合　包埋材料
2．多孔性載體　明膠　瓊脂糖　醋酸纖維素　聚丙烯酰胺
三、1.休眠
3．?dāng)嚢琛⌒』稹￠g斷加熱
5．恒定　CaCl2　30
6．嚴(yán)格無菌
1．直接使用酶、固定化酶和固定化細(xì)胞催化的比較
直接使用酶固定化酶固定化細(xì)胞
酶的種類一種或幾種一種一系列酶
常用載體—高嶺土、皂土、硅膠、凝膠明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素、聚丙烯酰胺
制作方法—化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法包埋法
是否需要
營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)否否是
催化反應(yīng)單一或多種單一一系列
反應(yīng)底物各種物質(zhì)（大分子、小分子）各種物質(zhì)（大分子、小分子）小分子物質(zhì)
優(yōu)點(diǎn)催化效率高，低耗能、低污染等酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，同時(shí)，固定在載體上的酶還可以被反復(fù)利用成本低，操作更容易
不足對(duì)強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫和有機(jī)溶劑等環(huán)境條件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很難回收，不能被再次利用，提高了生產(chǎn)成本；反應(yīng)后酶會(huì)混在產(chǎn)物中，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng)，而在生產(chǎn)實(shí)踐中，很多產(chǎn)物的形成都是通過一系列的酶促反應(yīng)才能得到的固定后的細(xì)胞與反應(yīng)物不容易接近，尤其是大分子物質(zhì)，可能導(dǎo)致反應(yīng)效率下降等
2．具體操作過程中的注意事項(xiàng)
（1）酵母細(xì)胞所需要的活化時(shí)間較短，一般需要1h左右。此外，酵母細(xì)胞活化時(shí)體積會(huì)變大，因此活化前應(yīng)該選擇體積足夠大的容器，以避免酵母細(xì)胞的活化液溢出容器外。
（2）加熱使海藻酸鈉溶化是操作中最重要的一環(huán)，關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗，一定按照教材的提示進(jìn)行操作。海藻酸鈉的濃度涉及固定化細(xì)胞的質(zhì)量。如果海藻酸鈉濃度過高，將很難形成凝膠珠；如果濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少，影響實(shí)驗(yàn)效果。
凝膠珠顏色過淺，呈白色，說明海藻酸鈉溶液濃度低，包埋細(xì)胞少；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢球形，則說明海藻酸鈉溶液濃度偏高，制作失敗。
（3）剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時(shí)間，以便形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。檢驗(yàn)?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格，可以使用下列方法。一是用鑷子夾起一個(gè)凝膠珠放在實(shí)驗(yàn)桌上用手?jǐn)D壓，如果凝膠珠不容易破裂，沒有液體流出，就表明凝膠珠的制作成功。二是在實(shí)驗(yàn)桌上用力摔打凝膠珠，如果凝膠珠很容易彈起，也能表明制備的凝膠珠是成功的。
題型一酶或細(xì)胞固定化的方法
試分析下圖中，哪一種與用海藻酸鈉作載體制備的固定化酵母細(xì)胞相似？（）
解析：A、B選項(xiàng)適合于酶的固定化，C選項(xiàng)既用于酶固定，也可用于細(xì)胞固定。制備固定化酵母細(xì)胞用的是包埋法，即將酵母菌包埋在海藻酸鈉制成的凝膠珠中，所以與D選項(xiàng)相似。
答案：D
反思領(lǐng)悟：固定化酶和固定化細(xì)胞通常采用包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。海藻酸鈉作載體制備的是固定化酵母細(xì)胞。
題型二固定化酶或細(xì)胞的制備過程
在制備固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中，CaCl2溶液的作用是（）。
A．用于調(diào)節(jié)溶液pHB．用于進(jìn)行離子交換
C．用于膠體聚沉D．用于為酵母菌提供Ca2＋
解析：海藻酸鈉膠體在CaCl2這種電解質(zhì)溶液的作用下，發(fā)生聚沉，形成凝膠珠，其作用機(jī)理是由于鹽離子的電荷與膠體微粒電荷相互吸引，形成更大的膠體顆粒，類似于人體紅細(xì)胞與抗凝集素之間的凝集反應(yīng)。
答案：C
題型三酶和細(xì)胞固定化技術(shù)的應(yīng)用
（2010江蘇高考改編）下圖1表示制備固定化酵母細(xì)胞的有關(guān)操作，圖2是利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行酒精發(fā)酵的示意圖，下列敘述不正確的是（）。
A．剛?cè)芑暮Ｔ逅徕c應(yīng)迅速與活化的酵母菌混合制備混合液
B．圖1中X溶液為CaCl2溶液，其作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠
C．圖2發(fā)酵過程中攪拌的目的是為了使培養(yǎng)液與酵母菌充分接觸
D．圖1中制備的凝膠珠用蒸餾水洗滌后再轉(zhuǎn)移到圖2裝置中
解析：剛?cè)芑暮Ｔ逅徕c應(yīng)冷卻后再與酵母菌混合，否則溫度過高會(huì)導(dǎo)致酵母菌死亡。
答案：A
1．固定化酶技術(shù)常采用（）。
A．包埋法B．化學(xué)結(jié)合和物理吸附法
C．活化法D．微囊化法
2．在使用包埋法固定細(xì)胞中，下列哪一項(xiàng)不是常用的載體？（）
A．明膠B．瓊脂糖C．海藻酸鈉D．纖維素
3．下面是制備固定化酵母細(xì)胞的步驟，其中排列順序正確的是（）。
①配制CaCl2溶液　②配制海藻酸鈉溶液　③海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合　④酵母細(xì)胞的活化?、莨潭ɑ湍讣?xì)胞
A．①②③④⑤B．④①③②⑤C．④⑤②①③D．④①②③⑤
4．下列關(guān)于固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述，正確的是（）。
A．固定化細(xì)胞技術(shù)在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢(shì)明顯
B．固定化酶的應(yīng)用中，要控制好pH、溫度和溶解氧
C．利用固定化酶降解水體中有機(jī)磷農(nóng)藥，需提供適宜的營(yíng)養(yǎng)條件
D．利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵，糖類的作用只是作為反應(yīng)底物
5．（2011江蘇高考）下列有關(guān)酶的制備和應(yīng)用的敘述，正確的是（）。
A．酶解法和吸水漲破法常用于制備微生物的胞內(nèi)酶
B．透析、電泳和酸解等方法常用于酶的分離與純化
C．棉織物不能使用添加纖維素酶的洗衣粉進(jìn)行洗滌
D．多酶片中的胃蛋白酶位于片劑的核心層

答案：1．B　酶的體積較小，容易從包埋材料中漏出來，所以一般采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定化。
2．D　常用的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等。
3．D　制備固定化酵母細(xì)胞的基本步驟是：酵母細(xì)胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母細(xì)胞。
4．A　A項(xiàng)中，固定化細(xì)胞技術(shù)最大的用途就是連續(xù)催化反應(yīng)。B項(xiàng)中，不需控制溶解氧；C項(xiàng)中，不需各種營(yíng)養(yǎng)條件；D項(xiàng)中，糖類的作用不只是作為反應(yīng)底物。
5．A　酸解法不能用于酶的分離與純化，棉織物可以使用添加纖維素酶的洗衣粉洗滌，纖維素酶雖不能直接去除衣物上的污垢，但能使纖維的結(jié)構(gòu)變得蓬松，從而使?jié)B入到纖維深處的塵土和污垢能夠與洗滌劑充分接觸，使洗滌劑的去污效果更好。多酶片中的胃蛋白酶應(yīng)位于片劑的最表層。

2012屆高考生物第一輪酶母細(xì)胞的固定化導(dǎo)學(xué)案復(fù)習(xí)

第2講酶母細(xì)胞的固定化

一、如何理解固定化酶的作用和原理？

1．酶的催化活性依賴于酶的空間結(jié)構(gòu)及活性中心。所以在固定化要選擇適當(dāng)條件，力圖不使其活性中心的基團(tuán)受到影響。

2．酶固定化的方法很多，目前采用的固定化技術(shù)大致可分為三類：載體結(jié)合法(包括共價(jià)鍵結(jié)合法、離子結(jié)合法、物理吸附法)、交聯(lián)法和包埋法。上述幾種方法也可并用，稱為混合法。

(1)載體結(jié)合法：利用共價(jià)鍵、離子鍵和物理吸附法把酶固定在纖維素、瓊脂糖、多孔玻璃和離子交換樹脂等載體的固定化處。

(2)交聯(lián)法：交聯(lián)法是利用雙功能試劑的作用，在酶分子之間發(fā)生交聯(lián)，凝集成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)而制成的固定化酶。酶蛋白中的游離基團(tuán)(如氨基、巰基等)可參與交聯(lián)反應(yīng)。

(3)包埋法：包埋法是將酶包埋在聚合物凝膠的微細(xì)網(wǎng)絡(luò)中或被半透性的聚合物膜所包圍，使酶分子不能從凝膠的網(wǎng)絡(luò)中或膜中漏出，而小分子的底物和產(chǎn)物則可以自由通過凝膠網(wǎng)格和半透膜。

3．固定化酶應(yīng)用實(shí)例

將葡萄糖異化酶固定在果顆狀載體上→放入底部有許多小孔的反應(yīng)柱(酶顆粒不能通過，反應(yīng)液能通過)→葡萄糖溶液從反應(yīng)柱上端注入→流經(jīng)反應(yīng)柱→與葡萄糖異構(gòu)酶接觸→果糖從反應(yīng)柱下端流出。

4.對(duì)固定化酶的理解：可以使反應(yīng)過程管道化、自動(dòng)化，產(chǎn)物易從反應(yīng)液中回收；酶的穩(wěn)定性有所改進(jìn)；酶的使用效率提高。

1.(2010蘇南四市一模)固定化酶是從20世紀(jì)60年代迅速發(fā)展起來的一種技術(shù)。科研人員用海藻酸鈉作為包埋劑來固定小麥酯酶，以研究固定化酶的相關(guān)性質(zhì)和最佳固定條件。酶活力為固定化酶催化化學(xué)反應(yīng)的總效率，包括酶活性和酶的數(shù)量。下圖甲、乙、丙為部分研究結(jié)果。下列有關(guān)敘述中，錯(cuò)誤的是

A．由甲圖可知，固定化酯酶比游離酯酶對(duì)溫度變化適應(yīng)性更強(qiáng)

B．由乙圖可知，濃度為3%的海藻酸鈉包埋效果最好

C．由丙圖可知，固定化酯酶一般可重復(fù)使用3次，之后若繼續(xù)使用則酶活力明顯下降

D．固定化酶的酶活力較高，主要原因是增加了酶與底物的接觸面積

D

正確掌握固定酶的特性和識(shí)別圖形是突破口。甲圖可以看出在50度時(shí)游離酶的活性已經(jīng)很低，但是固定酶的活性依然很高，可以判定固定酶的溫度適應(yīng)范圍廣；乙圖反應(yīng)的時(shí)海藻酸鈉的濃度與酶活力的關(guān)系，可以看出濃度為3%時(shí)，酶活力最高；丙圖可以看出使用三次以后酶活力明顯下降；固定化酶與底物的基礎(chǔ)面積減少。

1.下列不屬于固定化酶在利用時(shí)的特點(diǎn)的是（）

A．有利于酶與產(chǎn)物分離

B．可以被反復(fù)利用

C．能自由出入依附的載體

D．一種固定化酶一般情況下不能催化一系列酶促反應(yīng)

C

掌握固定酶的知識(shí)時(shí)突破口。固定酶是把酶固定在特殊材料上，不能自由出入依附的載體。

（09江蘇高考生物）下列關(guān)于固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述，正確的是（）

A．固定化細(xì)胞技術(shù)在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢(shì)明顯

B．固定化酶的應(yīng)用中，要控制好pH、溫度和溶解氧

C．利用固定化酶降解水體中有機(jī)磷農(nóng)藥，需提供適宜的營(yíng)養(yǎng)條件

D．利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵，糖類的作用只是作為反應(yīng)底物

A

本題對(duì)固定化酶和固定化細(xì)胞進(jìn)行發(fā)散考查，固定化酶發(fā)揮作用，與溶解氧無關(guān)，B選項(xiàng)錯(cuò)；固定化酶不屬于生物，不需要提供營(yíng)養(yǎng)，而固定化細(xì)胞進(jìn)行生命活動(dòng)，是需要營(yíng)養(yǎng)的，C選項(xiàng)錯(cuò)；糖類既是酵母菌作用的底物，也是微生物培養(yǎng)所需碳源。

、下列有關(guān)固定化技術(shù)的敘述，正確的是（）

A．固定化酶只是在細(xì)胞內(nèi)才能發(fā)揮作用B．固定化酶能提高酶的利用率

C．酶的固定是酶分離純化的常用方法D．固定化酶的固定化方式就是吸附在固體表面上。

B

本題主要考查固定化酶的相關(guān)知識(shí)。考綱中的能力要求是A級(jí)。理解固定化技術(shù)的原理及優(yōu)點(diǎn)是本題的解題突破口。制成固定化酶的步驟是：酶的生產(chǎn)、提取、酶的分離純化、酶的固定化，制成固定化酶的方法有吸附在固體表面，有將酶相互連接起來．將酶包埋在細(xì)微的網(wǎng)格里等；這樣的固定化酶能重復(fù)利用，從而提高了酶的利用率；而酶在條件適宜時(shí)，既可在細(xì)胞內(nèi)起作用，也能在細(xì)胞外起作用，制成的固定化酶，更是主要在細(xì)胞外發(fā)揮作用。

二如何理解固定化細(xì)胞的作用和原理？

1、固定化微生物細(xì)胞利用微生物來生產(chǎn)酶，具有生產(chǎn)成本低、周期短、產(chǎn)量大等優(yōu)點(diǎn)。微生物產(chǎn)生的酶，可以分為分泌在細(xì)胞外的胞外酶和包含在細(xì)胞內(nèi)的胞內(nèi)酶。利用胞內(nèi)酶時(shí)，需要采用手段將細(xì)胞破碎后，將酶進(jìn)行分離純化，提取后酶的活性和穩(wěn)定性往往都受到很大的影響。

將微生物細(xì)胞限制或定位于特定空間位置，即將微生物制成固定化細(xì)胞后，既能避免復(fù)雜的細(xì)胞破碎、酶的提取和純化過程，又能使酶的活性和穩(wěn)定性得到較大提高。固定后的微生物細(xì)胞可以作為固體催化劑在多步酶促反應(yīng)中發(fā)揮連續(xù)催化作用，同時(shí)，催化反應(yīng)結(jié)束后又能被回收和重復(fù)利用。優(yōu)點(diǎn)：制備容易、酶的活性高且穩(wěn)定。

2、固定化活細(xì)胞的制備主要方法：包埋法。將微生物細(xì)胞用物理方法包埋多微也載體內(nèi)部。凝膠包埋是最常用的方法，凝膠種類有瓊脂、海藻酸鈉（鈣）、角叉菜聚糖、明膠和聚丙烯酰胺凝膠。

目前常用海藻酸鈣包埋法，其基本原理是：先將水溶性的海藻酸鈉配成水溶液，并把細(xì)胞分散在其中，然后將其滴入凝固浴中(常用CaCl2溶液)，使海藻酸鈉中Na+的部分被Ca2+所取代而形成由多價(jià)離子交聯(lián)的離子網(wǎng)絡(luò)凝膠。這種方法操作簡(jiǎn)便，條件溫和，對(duì)細(xì)胞無毒性，適合于生長(zhǎng)細(xì)胞的固定化。但磷酸鹽會(huì)使凝膠結(jié)構(gòu)破壞，在使用時(shí)應(yīng)控制好培養(yǎng)基中磷酸鹽的濃度，并要在培養(yǎng)基中保持一定濃度的鈣離子，以維持凝膠結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。

3、比較直接使用酶、固定化酶和固定化細(xì)胞催化的優(yōu)缺點(diǎn)。

類型優(yōu)點(diǎn)不足

直接

使用酶催化效率高，低耗能，低污染對(duì)環(huán)境非常敏感，易失活；難回收，不能再次利用，與產(chǎn)物混在一起，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量

固

定

化

酶(1)極易將固定化酶與底物、產(chǎn)物分開；產(chǎn)物溶液中沒有酶的殘留，簡(jiǎn)化了提純工藝。

(2)可以在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)反復(fù)使用，有利于工藝的連續(xù)化、管道化。

(3)酶反應(yīng)過程可以嚴(yán)格控制，有利于工藝自動(dòng)化和微電腦化。

(4)在絕大多數(shù)情況下提高了酶的穩(wěn)定性。

(5)較能適應(yīng)于多酶反應(yīng)。

(6)酶的使用效率提高，產(chǎn)物得率提高，產(chǎn)品質(zhì)量有保障，成本低。(1)酶固定化時(shí)酶的活力有所損失。同時(shí)也增加了固定化的成本，使工廠開始投資大。

(2)比較適應(yīng)水溶性底物和小分子底物。

(3)與完整細(xì)胞比較，不適于多酶反應(yīng)，特別是需要輔因子的反應(yīng)，同時(shí)對(duì)胞內(nèi)酶需經(jīng)分離后，才能固定化。

（4）一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng)，生產(chǎn)實(shí)踐中，很多產(chǎn)物的形成是通過一系列的酶促反應(yīng)得到的。

固

定

化

細(xì)

胞(1)省去了酶的分離手續(xù)．為多酶系統(tǒng)，無須輔因子再生。

(2)細(xì)胞生長(zhǎng)快、而且多、反應(yīng)快。

(3)可以連續(xù)發(fā)酵，節(jié)約了成本，而且在蒸餾和提取前不用分離去細(xì)胞，能一邊徘出發(fā)酵液，一邊進(jìn)行培養(yǎng)，排除了產(chǎn)物抑制和消耗。

(4)保持酶在細(xì)胞內(nèi)的原始狀況，增加了酶的穩(wěn)定、特別是對(duì)污染因子的抵抗力增加。(1)必須保持菌體的完整，防止菌體自溶，否則，將影響產(chǎn)品純度。

(2)必須防止細(xì)胞內(nèi)蛋白酶對(duì)所需酶的分解，同時(shí)，需抑制胞內(nèi)其他酶的活性止副產(chǎn)物的形成。

(3)細(xì)胞膜、壁會(huì)阻礙底物滲透和擴(kuò)散。

1.下列說法不正確的是（）

A．葡萄糖與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸，轉(zhuǎn)化成的是果糖

B．從固定化酶反應(yīng)柱下端流出的是果糖

C．高果糖漿不會(huì)像蔗糖那樣誘發(fā)肥胖、糖尿病、齲齒和心血管疾病

D．酶溶解于葡萄糖溶液后，可從糖漿中回收

D

正確區(qū)別固定化酶與酶制劑是關(guān)鍵。葡萄糖異構(gòu)酶催化葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖；在反應(yīng)柱上方流進(jìn)葡萄糖溶液，下方流出果糖；果糖和蔗糖相比較具有很多優(yōu)點(diǎn)；酶不會(huì)溶解在反應(yīng)液中，因?yàn)樗还潭ㄔ谳d體材料中。

1.關(guān)于固定化酶和一般酶制劑在應(yīng)用效果上的說法錯(cuò)誤的是()

A．固定化酶生產(chǎn)活性強(qiáng)，可長(zhǎng)久使用

B．一般酶制應(yīng)用后和產(chǎn)物混在一起，產(chǎn)物的純度不高

C．一般酶制劑參加反應(yīng)后不能重復(fù)利用

D．固定化酶可以反復(fù)利用，降低生產(chǎn)成本，提高產(chǎn)量和質(zhì)量

A

區(qū)分固定化酶與酶制劑是本題的解題突破口。該題主要考查了固定化酶的優(yōu)點(diǎn)，即應(yīng)用后易與產(chǎn)物分離，提高產(chǎn)品質(zhì)量；可以反復(fù)利用，降低生產(chǎn)成本。但是固定化酶作為生物催化劑，具有一定的生物活性。隨著時(shí)間的推移，酶的活性會(huì)降低，甚至消失，即固定化酶不能長(zhǎng)久使用。例如：生產(chǎn)高果糖漿的固定化酶一般只能連續(xù)使用半年。

試分析下圖中，哪一種與用海藻酸鈉作載體制備的固定化酵母細(xì)胞相似（）

D。

本題主要考查酶固定和細(xì)胞固定的相關(guān)知識(shí)?？季V中的能力要求是A級(jí)。區(qū)分酶固定和細(xì)胞固定的方法是本題的解題突破口。解析過程：A是吸附法，常用于將酶固定；B是載體結(jié)合法多用于酶的固定；C和D是包埋法，C一般是將酶包埋在微網(wǎng)絡(luò)里，D是包埋在凝膠中。制備固定化酵母用的是包埋法，即將酵母菌包埋在海藻酸鈉制成的凝膠中，所以與D相似。

三制備固定化酵母細(xì)胞并進(jìn)行酒精發(fā)酵

1.制備固定化酵母細(xì)胞流程

2.制備固定化酵母細(xì)胞主要操作過程

（1）酵母細(xì)胞的活化。在缺水的狀態(tài)下，微生物會(huì)處于休眠狀態(tài)?；罨褪亲屘幱谛菝郀顟B(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。酵母細(xì)胞所需要的活化時(shí)間較短，一般需要O．5～1h，要提前做好準(zhǔn)備。此外，酵母細(xì)胞活化時(shí)體積會(huì)變大，因此活化前應(yīng)該選擇體積足夠大的容器，以避免酵母細(xì)胞的活化液溢出容器外。

（2）海藻酸鈉溶液的配制和使用：對(duì)海藻酸鈉溶化時(shí)要用小火或間斷加熱，避免海藻酸鈉發(fā)生焦糊；溶化后先冷卻至室溫，再與酵母細(xì)胞混合，避免高溫殺死酵母細(xì)胞；固定化酵母細(xì)胞時(shí)，應(yīng)將海藻酸鈉酵母細(xì)胞的混合液用注射器緩慢滴加到CaCl2溶液中，而不是注射。海藻酸鈉的濃度涉及到固定化細(xì)胞的質(zhì)量。如果海藻酸鈉濃度過高，將很難形成凝膠珠；如果濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少影響實(shí)驗(yàn)效果。

（3）CaCl2的作用是使海藻酸鈉膠體發(fā)生聚沉，形成凝膠珠。剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時(shí)間，以便形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。

（4）凝膠珠的檢測(cè)：穩(wěn)定30min以后，一是用鑷子夾起一個(gè)凝膠珠放在實(shí)驗(yàn)桌上用手?jǐn)D壓，如果凝膠珠不容易破裂，沒有液體流出，就表明凝膠珠制作成功。二是在實(shí)驗(yàn)桌上用力摔打凝膠珠，如果凝膠珠很容易彈起，也能表明制備的凝膠珠是成功的。

1．（2010江蘇）右圖1表示制備固定化酵母細(xì)胞的有關(guān)操作，圖2是利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行酒精發(fā)酵的示意圖。下列敘述正確的是

A．剛?cè)芑暮Ｔ逅徕c應(yīng)迅速與活化的酵母菌混合制備混合液

B．圖1中X溶液為CaCl2溶液，其作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠

C．圖2發(fā)酵過程中攪拌的目的是為了使培養(yǎng)液與酵母菌充分接觸

D．圖1中制備的凝膠珠用蒸餾水洗滌后再轉(zhuǎn)移到圖2裝置中

BCD

正確掌握準(zhǔn)備固定酵母細(xì)胞的方法和意義是關(guān)鍵。搞清固定過程所涉及的材料，明確酒精發(fā)酵的流程及操作意義。

1、（09屆鹽城市摸底）下列有關(guān)固定化酵母細(xì)胞制備步驟正確的是()

A．應(yīng)使干酵母與自來水混合并攪拌，以利于酵母菌活化

B．配制海藻酸鈉溶液時(shí)要用小火間斷加熱的方法

C．向剛?cè)芑玫暮Ｔ逅徕c溶液中加入已活化的酵母細(xì)胞，充分?jǐn)嚢璨⒒旌暇鶆?/p>

D．將與酵母細(xì)胞混勻的海藻酸鈉液注入CaCl2溶液中，會(huì)觀察到CaCl2溶液中有球形或橢珠形的凝膠形成

B。

本題主要考查固定化酵母細(xì)胞的相關(guān)知識(shí)。考綱中的能力要求是B級(jí)。掌握固定化酵母細(xì)胞的方法和步驟是本題的解題突破口。解析過程：由于在缺水狀態(tài)下，微生物處于休眠狀態(tài)，為了加速酵母細(xì)胞的活化，將干酵母與蒸餾水混合后應(yīng)用玻璃棒充分?jǐn)嚢?。為避免海藻酸鈉發(fā)生焦糊，溶化時(shí)要小火間斷加熱。如果將剛?cè)芑玫暮Ｔ逅徕c與已活化的酵母細(xì)胞混合，有可能會(huì)殺死酵母細(xì)胞。將與酵母細(xì)胞混勻的海藻酸鈉用注射器緩慢滴加到CaCl2溶液中，而不是注入。

.（2009通州調(diào)研）固定化酶是從20世紀(jì)60年代迅速發(fā)展起來的一種技術(shù)。東北農(nóng)業(yè)大學(xué)科研人員利用雙重固定法，即采用戊二醛作交聯(lián)劑（使酶相互連接），海藻酸鈉作為包埋劑來固定小麥酯酶，研究固定化酶的性質(zhì)，并對(duì)其最佳固定條件進(jìn)行了探究。下圖顯示的是部分研究結(jié)果（注：酶活力為固定化酶催化化學(xué)反應(yīng)的總效率，包括酶活性和酶的數(shù)量），分析回答：

（1）從對(duì)溫度變化適應(yīng)性和應(yīng)用范圍的角度分析，甲圖所示結(jié)果可以得出的結(jié)論是______。

（2）乙圖曲線表明濃度為________的海藻酸鈉包埋效果最好，當(dāng)海藻酸鈉濃度較低時(shí)，酶活力較低原因是___________。

（3）固定化酶的活力隨使用次數(shù)的增多而下降，由丁圖可知，固定化酯酶一般可重復(fù)使用______次，酶活力明顯下降。

（4）固定小麥酯酶不采用海藻酸鈉直接包埋，同時(shí)用戊二醛作交聯(lián)劑，這是因?yàn)開______。

（1）固定化酯酶比游離酯酶對(duì)溫度變化適應(yīng)性更強(qiáng)且應(yīng)用范圍較廣（2）3%海藻酸鈉濃度較低時(shí)包埋不緊密，酶分子容易漏出，數(shù)量不足（3）3（4）酶分子很小，很容易從包埋材料中漏出

理解利用固定化酶的制作、工作原理、優(yōu)缺點(diǎn)是解決本題的突破口。固定化酶應(yīng)用后易與產(chǎn)物分離，提高產(chǎn)品質(zhì)量；可以反復(fù)利用，降低生產(chǎn)成本。但是固定化酶作為生物催化劑，具有一定的生物活性。隨著時(shí)間的推移，酶的活性會(huì)降低，甚至消失，即固定化酶不能長(zhǎng)久使用。

3.（09江蘇卷）酶解法制備原生質(zhì)體的原理是利用酶溶液對(duì)細(xì)胞壁成分的降解作用。蝸牛酶液從蝸牛（以植物為食）消化腺中提??；果膠酶、纖維素酶從微生物中提取。為了研究不同酶液的酶解效果，某實(shí)驗(yàn)小組取無菌煙草幼葉，切成相同大小的小片，等量放入6支試管中，試劑用量和實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于下表。請(qǐng)回答有關(guān)問題。

試管編號(hào)

項(xiàng)目IⅡⅢⅣVⅥ

蒸餾水（mL）2O1111

緩沖液（mL）0210.50.50.5

果膠酶液（mL）O0O0.5O0

蝸牛酶液（mL）O0OO0.50

纖維素酶液（mL）0O0O00.5

實(shí)驗(yàn)結(jié)果（綠色深淺程度）－－－+++++++++

（注：“+”越多表示綠色越深，“一”表示顏色無顯著變化）

（1）實(shí)驗(yàn)過程中，需要輕搖試管，其目的是，使原生質(zhì)體從葉小片中游離出來，以便觀察懸浮液綠色的深淺。

（2）從綠色的深淺可推測(cè)：蝸牛酶液酶解效果最好，原因是蝸牛酶液含有等多種酶。該實(shí)驗(yàn)中是空白對(duì)照組，其設(shè)置意義是。

（3）用網(wǎng)篩過濾原生質(zhì)體到離心管內(nèi)，離心后收集沉淀物，并用洗滌。

（4）原生質(zhì)體是否符合要求還需進(jìn)行檢驗(yàn)，其檢驗(yàn)的方法是。

（1）為了使細(xì)胞壁與酶充分接觸，提高酶解效果（2）果膠酶和纖維素酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ排除無關(guān)變量的干擾（3）等滲溶液（4）低滲漲破法

本題考查有關(guān)酶的催化效率的實(shí)驗(yàn)，（1）實(shí)驗(yàn)過程中，需要輕搖試管，可以使細(xì)胞壁與酶充分接觸，可以提高酶解效果（2）蝸牛以植物為食，所以唾液酶中含有果膠酶和纖維素酶，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ沒有添加酶溶液為空白對(duì)照組。其目的是排除無關(guān)變量的干擾。（3）離心后收集沉淀物，并用等滲溶液清洗，目的是保持細(xì)胞正常形態(tài)。（4）要用低滲漲破法來檢驗(yàn)原生質(zhì)體是否符合要求，若沒有細(xì)胞壁則可以漲破，有則不能漲破。

1、固定酶的方法可分為三類：載體結(jié)合法(包括共價(jià)鍵結(jié)合法、離子結(jié)合法、物理吸附法)、交聯(lián)法和包埋法。

2、固定酶的優(yōu)點(diǎn)：可以重復(fù)多次使用，和反應(yīng)物分離提純?nèi)菀住?/p>

3、固定酶的缺點(diǎn)：只能催化單一反應(yīng)，固定過程會(huì)對(duì)酶的活性產(chǎn)生影響。

4、固定細(xì)胞的方法：包埋法，用海藻酸鈉包埋。

5、海藻酸鈉小火融化防止燒糊，酵母菌要加水活化，溶化的海藻酸鈉要冷卻至室溫加入活化的酵母菌攪拌均勻。

6、CaCl2的作用是使海藻酸鈉膠體發(fā)生聚沉，形成凝膠珠。

觀察蝗蟲精母細(xì)胞減數(shù)分裂固定裝片

作為杰出的教學(xué)工作者，能夠保證教課的順利開展，作為高中教師就要精心準(zhǔn)備好合適的教案。教案可以讓講的知識(shí)能夠輕松被學(xué)生吸收，幫助高中教師營(yíng)造一個(gè)良好的教學(xué)氛圍。你知道怎么寫具體的高中教案內(nèi)容嗎？下面是由小編為大家整理的“觀察蝗蟲精母細(xì)胞減數(shù)分裂固定裝片”，相信您能找到對(duì)自己有用的內(nèi)容。

★★★
處于繁殖期的雄蝗蟲，精巢里的正在進(jìn)行減數(shù)分裂。因此，在它的精巢內(nèi)可以找到處于減數(shù)分裂不同階段的細(xì)胞—、、。通過觀察處于減數(shù)分裂不同階段的細(xì)胞，可以了解減數(shù)分裂的大致過程。

通過觀察蝗蟲精母細(xì)胞減數(shù)分裂固定裝片，識(shí)別減數(shù)分裂不同階段的染色體的形態(tài)、位置和數(shù)目，加深對(duì)減數(shù)分裂過程的理解。

一、材料用具
蝗蟲精母細(xì)胞減數(shù)分裂固定裝片，顯微鏡。
二、方法步驟
1.調(diào)好顯微鏡，把蝗蟲精母細(xì)胞減數(shù)分裂固定裝片放到顯微鏡的載物臺(tái)上，用壓片夾夾好。
2．在低倍顯微鏡下觀察。識(shí)別初級(jí)精母細(xì)胞、次級(jí)精母細(xì)胞和精細(xì)胞。
3．先用依次找到減數(shù)第一次分裂中期、后期和減數(shù)第二次分裂中期、后期的細(xì)胞，再在
下仔細(xì)觀察染色體的。
4．根據(jù)觀察結(jié)果，嘗試?yán)L制減數(shù)第一次分裂后期和減數(shù)第二次分裂后期的細(xì)胞簡(jiǎn)圖。
繪圖：

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)論
根據(jù)觀察結(jié)果，描述動(dòng)物細(xì)胞減數(shù)分裂各個(gè)時(shí)期的染色體變化的特點(diǎn)：

★★★
1.實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵及注意事項(xiàng)。
實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵：掌握顯微鏡下區(qū)分減數(shù)第一次及減數(shù)第二次分裂時(shí)期細(xì)胞的方法；
注意事項(xiàng)：觀察時(shí)遵循先低倍鏡觀察，后高倍鏡觀察的順序，使用高倍鏡時(shí)候只能調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。
2.當(dāng)用低倍鏡看清楚后,轉(zhuǎn)換成高倍鏡后卻看不到或看不清染色體，試簡(jiǎn)述其原因。
主要原因有：沒有調(diào)焦距；物象沒有移向視野的中央；裝片放反；高倍鏡頭損壞等。
3.減數(shù)分裂各個(gè)細(xì)胞時(shí)期的特點(diǎn)：
間期：看不到染色體；
減Ⅰ前期：出現(xiàn)染色體，同源染色體聯(lián)會(huì)，出現(xiàn)四分體；
減Ⅰ中期：同源染色體在赤道板位置成對(duì)排列；
減Ⅰ后期：同源染色體分離；
減Ⅱ中期：非同源染色體成單排列在赤道板位置；
減Ⅱ后期：著絲點(diǎn)分裂；
減Ⅱ末期：染色體逐漸消失。

一、問題思考
當(dāng)你的目光聚焦在顯微鏡視野中的一個(gè)細(xì)胞時(shí)，你是怎么判斷它是處于減數(shù)第一次分裂時(shí)期，還是處于減數(shù)第二次分裂時(shí)期的？

二、探究創(chuàng)新
1.如果要觀察植物細(xì)胞的減數(shù)分裂，應(yīng)該選擇植物哪個(gè)部位細(xì)胞？

例1：蝗蟲體細(xì)胞中的染色體數(shù)為2N，用該蝗蟲的精巢做成的切片放在顯微鏡下觀察，可以看到細(xì)胞中的染色體數(shù)目可能為()
①1N②2N③3N④4N
A、②B、①②C、①②④D、②③④
精原細(xì)胞的增殖方式為有絲分裂，染色體數(shù)可為②、④項(xiàng)，精原細(xì)胞形成精子的方式為減數(shù)分裂，染色體數(shù)可為①②項(xiàng)。答案：C
例2：某動(dòng)物（2N=10），其一滴精液中有核DNA分子8800個(gè)，那么這一精液中的精子是由多少個(gè)精原細(xì)胞產(chǎn)生的（理論值）是
A．8800B．2200C．440D．220
從題意可知，該動(dòng)物的體細(xì)胞中含有10條染色體，故該動(dòng)物的一個(gè)精子中含有5條染色體，5個(gè)DNA分子。一個(gè)精原細(xì)胞可以形成4個(gè)成熟的精子，因此計(jì)算方法為：8800÷5÷4=440個(gè)精原細(xì)胞。答案：C
例3：果蠅的精子內(nèi)有4條染色體，那么，它的初級(jí)精母細(xì)胞內(nèi)的四分體數(shù)目、染色體數(shù)目和染色單體數(shù)目分別是（）
A．2個(gè)、4條和8條B．4個(gè)、8條和8條
C．4個(gè)、8條和16條D．8個(gè)、16條和32條
果蠅的精子內(nèi)有4條染色體，那么體細(xì)胞有8條染色體，初級(jí)精母細(xì)胞內(nèi)的四分體數(shù)目、染色體數(shù)目和染色單體數(shù)目分別是4個(gè)、8條和16條。答案：C
例4：在精子的形成過程中，初級(jí)精母細(xì)胞四分體時(shí)期所形成的細(xì)胞是（）

圖B反映的是同源染色體兩兩配對(duì)，為聯(lián)會(huì)期，而C圖配對(duì)的同源染色體可以見到四個(gè)分體，為四分體時(shí)期。答案：C

1.下列關(guān)于減數(shù)分裂和有絲分裂過程的共同點(diǎn)的敘述，不正確的是（）
A．染色體復(fù)制1次，著絲點(diǎn)分裂1次
B．染色體與核DNA均等分配
C．細(xì)胞質(zhì)和核物質(zhì)均等分配
D．分裂間期染色體復(fù)制，DNA數(shù)目加倍
解析　卵細(xì)胞形成過程中細(xì)胞質(zhì)是不均等分配的。
答案　C
2.某生物的體細(xì)胞染色體數(shù)為2n。該生物減數(shù)第二次分裂與有絲分裂的相同之處是（）
A．分裂開始前，都進(jìn)行染色體的復(fù)制
B．分裂開始時(shí)，每個(gè)細(xì)胞中的染色體數(shù)都是2n
C．分裂過程中，每條染色體的著絲點(diǎn)都分裂成兩個(gè)
D．分裂結(jié)束后，每個(gè)子細(xì)胞的染色體數(shù)都是n
答案：C
3.某動(dòng)物（2N=10）的一滴精液里有440個(gè)核DNA分子，這滴精液中的精子來源于多少個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞（）
A.11個(gè)B.22個(gè)C.44個(gè)D.88個(gè)
答案：B

第四節(jié)酶的固定化

第四節(jié)酶的固定化

1．掌握固定化酶和固定化細(xì)胞的作用和原理

2．嘗試制備固定化酶，并檢驗(yàn)酶的活性

1．固定化酶定義：通過或的方法，將水溶性的與不溶性的

結(jié)合，使酶固定在上，并在一定的空間范圍內(nèi)進(jìn)行，這樣制成的酶稱為。①：將酶通過以結(jié)合到等上。方法②:將酶均勻在等多孔性的中的固定化方法。③：將酶吸附在載體表面上而被固定。優(yōu)點(diǎn)：固定化酶活性，可以使用次。工業(yè)生產(chǎn)可以實(shí)現(xiàn)、、極大降低生產(chǎn)成本。2．固定化細(xì)胞定義：利用適當(dāng)?shù)膶⒑铣擅傅墓潭ㄆ饋?。方法：多采用包埋固定法。（原因：?xì)胞個(gè)大，而酶分子較??；個(gè)大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合，而個(gè)小的酶容易從包埋材料中漏出。優(yōu)點(diǎn)：操作更容易更，使用更長(zhǎng)。固定化細(xì)胞不需要酶的提取，減少了酶活力的損失和操作。（向下移動(dòng)位置）實(shí)踐案例：木瓜蛋白酶的固定化

1．木瓜蛋白酶的作用：可以使蛋白質(zhì)水解成，供酵母菌所需，從而發(fā)酵時(shí)間，提高啤酒，使酒質(zhì)醇和。2．材料器具：見課本49頁3．活動(dòng)程序：（1）酶的固定化方法：

↓載體：

經(jīng)一系列操作后，即可得到。（2）檢驗(yàn)酶的活性最適宜溫度

↓雙縮脲試劑A液和B液1號(hào)燒杯顏色：

2號(hào)燒杯顏色：

原因

（3）酶的再利用3號(hào)燒杯顏色

↓說明了。（向下移動(dòng)）（4）結(jié)果記錄小結(jié)：和技術(shù)的應(yīng)用，大大提高了酶在生產(chǎn)上的利用率。

探究活動(dòng)：大腸桿菌細(xì)胞的固定化

1．用培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，取1ml加入燒杯中，再加入8ml和體積分?jǐn)?shù)為9%的1．6ml，攪拌均勻，待凝固后，切成小塊，用和洗滌，即得到固定化大腸桿菌細(xì)胞。

2．胰凝乳蛋白酶的固定化

從提取，并以為載體，將胰凝乳蛋白酶固定化。

1．學(xué)法指導(dǎo)：本節(jié)課應(yīng)初步學(xué)會(huì)固定化酶的方法，引導(dǎo)學(xué)生理解固定化細(xì)胞和固定化酶這兩種技術(shù)的區(qū)別與聯(lián)系，辯證地認(rèn)識(shí)這兩種技術(shù)的優(yōu)勢(shì)與不足。本節(jié)課的固定化酶的方法和制備固定木瓜蛋白酶的操作過程應(yīng)引起重視，在高考選擇題和實(shí)驗(yàn)題中都有可能體現(xiàn)。2．疑難解析：辯證地認(rèn)識(shí)固定化細(xì)胞和固定化酶兩種技術(shù)的優(yōu)勢(shì)與不足。如：固定化細(xì)胞操作容易，對(duì)酶活性的影響更小，可以催化一系列的反應(yīng)，容易回收等，但由于大分子物質(zhì)難以自由通過細(xì)胞膜，因此固定化細(xì)胞的應(yīng)用也受到限制。

1．關(guān)于固定化酶技術(shù)說法正確的是（）

A．固定化酶技術(shù)就是固定反應(yīng)物，將酶依附著載體圍繞反應(yīng)物旋轉(zhuǎn)的技術(shù)

B．固定化酶的優(yōu)勢(shì)在于能催化一系列的酶促反應(yīng)

C．固定化酶中的酶無法重復(fù)利用

D．固定化酶是將酶固定在一定空間的技術(shù)

[解析]固定化酶是利用物理或化學(xué)方法將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，其優(yōu)點(diǎn)是酶被固定在一定裝置內(nèi)可重復(fù)利用，不足是無法同時(shí)解決一系列酶促反應(yīng)。

[答案]D

2．研究認(rèn)為，用固定化酶技術(shù)處理污染物是很有前途的。如將從大腸桿菌得到的磷酸二酯酶固定到尼龍膜上制成制劑，可用于降解殘留在土壤中的有機(jī)磷農(nóng)藥，與用微生物降解相比，其作用不需要適宜的（）

A．溫度B．PHC．水分D．營(yíng)養(yǎng)

[解析]固定化酶技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),利用了酶的高效性和專一性．酶與微生物比較來說,它的活性發(fā)揮不需要營(yíng)養(yǎng)．

[答案]D

第四節(jié)酶的固定化

1．物理化學(xué)酶載體載體催化反應(yīng)固定化酶共價(jià)鍵結(jié)合法化學(xué)反應(yīng)共價(jià)鍵尼龍載體包埋法包埋瓊脂糖凝膠凝膠物理吸附法穩(wěn)定反復(fù)多大批量連續(xù)化自動(dòng)化2．載體細(xì)胞簡(jiǎn)捷壽命

1．氨基酸增殖縮短產(chǎn)量澄清3．（1）共價(jià)鍵結(jié)合法尼龍布尼龍固定化酶（2）45℃紫色絡(luò)合物藍(lán)色蛋白質(zhì)被分解為氨基酸，所以加雙縮脲試劑不起作用（3）深藍(lán)色酶的重復(fù)再利用（4）固定化酶固定化細(xì)胞