高中力的分解教案

選修一生物2.3分解纖維素的微生物的分離學(xué)案（人教版）。

一名優(yōu)秀的教師在教學(xué)方面無論做什么事都有計劃和準(zhǔn)備，作為教師就要在上課前做好適合自己的教案。教案可以讓學(xué)生們能夠在上課時充分理解所教內(nèi)容，讓教師能夠快速的解決各種教學(xué)問題。那么如何寫好我們的教案呢？以下是小編為大家收集的“選修一生物2.3分解纖維素的微生物的分離學(xué)案（人教版）”歡迎大家閱讀，希望對大家有所幫助。

相關(guān)閱讀

高二生物《分解纖維素的微生物的分離》典型教案分析

一名優(yōu)秀的教師在教學(xué)時都會提前最好準(zhǔn)備，高中教師要準(zhǔn)備好教案，這是每個高中教師都不可缺少的。教案可以讓講的知識能夠輕松被學(xué)生吸收，幫助高中教師在教學(xué)期間更好的掌握節(jié)奏。那么怎么才能寫出優(yōu)秀的高中教案呢？下面是小編精心為您整理的“高二生物《分解纖維素的微生物的分離》典型教案分析”，但愿對您的學(xué)習(xí)工作帶來幫助。

高二生物《分解纖維素的微生物的分離》典型教案分析

纖維素，一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。

纖維素與纖維素酶

（1）棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，木材、作物秸稈等也富含纖維素。

（2）纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。纖維素最終被水解成葡萄糖，為微生物的生長提供營養(yǎng)。

纖維素分解菌的篩選

（1）篩選方法：剛果紅染色法。能夠通過顏色反應(yīng)直接對微生物進(jìn)行篩選。

（2）剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理

剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅－纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。

分離分解纖維素的微生物的實驗流程

土壤取樣→選擇培養(yǎng)（此步是否需要，應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定）→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落

（1）土壤采集選擇富含纖維素的環(huán)境。

（2）剛果紅染色法分離纖維素分解菌的步驟倒平板操作、制備菌懸液、涂布平板

（3）剛果紅染色法種類

一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，另一種是在倒平板時就加入剛果紅。

課題延伸

對分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選后，只是分離純化的第一步，為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。纖維素酶的測定方法，一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測定。

疑難解答

（1）為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌？

由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對提高，因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。

（2）將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深？

將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對聚集，實際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。

（3）兩種剛果紅染色法的比較

方法一是傳統(tǒng)的方法，缺點是操作繁瑣，加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；其優(yōu)點是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點是操作簡便，不存在菌落混雜問題，缺點是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊，因為培養(yǎng)基中纖維素占主要地位，因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點是：有些微生物具有降解色素的能力，它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅形成明顯的透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分。

（4）為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物？

在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮”的作用。

觀察土壤中能水解纖維素的微生物

輔導(dǎo)教案
導(dǎo)學(xué)誘思DAOXUEYOUSI

一、纖維素
1．化學(xué)組成：由________三種元素組成，屬于________類中的________。ks5u
2．植物的細(xì)胞壁主要由________、________和________組成。ks5u
答案：1.C、H、O　糖　多糖
2．纖維素　木質(zhì)素　半纖維素
ks5u
二、水解纖維素的微生物
1．現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的能水解纖維素的微生物：
________、________、________、________等。
2．這些微生物能水解纖維素的原因：
它們能分泌________，________分解纖維素。
答案：1.綠色木霉　變異青霉　黑曲霉　根霉
2．纖維素酶　酶促

三、纖維素酶
1．纖維素酶：不是單一的一種酶，而是________，它包括________酶、________酶和________酶，不同酶________不同。
2．纖維素酶的作用：纖維素酶能催化水解纖維素(具體作用如下)

答案：1.一類酶的總稱　C1　CX　β葡萄糖苷　水解的作用

四、觀察土壤中能水解纖維素的微生物實驗
1．實驗材料：
(1)80g______土或______的土：可以從其中獲得________。
(2)________紙(90cm2)2張
(3)自來水
(4)________的紙6張：從其中獲得________
2．實驗步驟：
(1)滅菌：將培養(yǎng)皿、三角瓶、自來水以及________土壤用滅菌鍋在1kg壓力下滅菌30min。
(2)設(shè)置對照實驗：
將________和________等量土壤分別放在2個經(jīng)滅菌處理的培養(yǎng)皿中，互相形成對照。
(3)培養(yǎng)
將________等分成2份，分別放在上述2個有土樣的培養(yǎng)皿的________，培養(yǎng)皿不加蓋，可用牛皮紙遮蓋保濕。然后置于________的培養(yǎng)室中。________周后觀察卷煙紙的變化(是否消失)。
答案：1.(1)草炭　枯樹周邊　能水解纖維素的微生物　(2)牛皮　(4)卷煙　纖維素
2．(1)一半　(2)已滅菌　未滅菌的　(3)6張卷煙紙　土壤表面　較高濕度　4～6

核心解讀HEXINJIEDU
1．纖維素在元素化合物分類上的地位是怎樣的？纖維素與纖維素酶一樣嗎？
組成生物各種化學(xué)元素一般都以化合物形式存在。其中纖維素是糖類中多糖的一種，而纖維素酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，它能催化水解纖維素。它們在化合物的分類系統(tǒng)中所處的位置見下表。
2．為什么從卷煙紙中去獲取纖維素呢？為什么纖維素不直接從植物枝條上獲取呢？
植物的細(xì)胞壁主要由纖維素、木質(zhì)素和半纖維素組成。因此纖維素主要來自植物，如木材、蘆葦和甘蔗，主要用于造紙。造紙時取樹皮再用NaOH處理以去除木質(zhì)素和半纖維素，但保留纖維素。木質(zhì)素可抑制纖維素酶的活力。
卷煙紙一般不含木質(zhì)素，因為木質(zhì)素所含有的苯酚對人體有害。因此從卷煙紙中既能獲得纖維素，又不會有木質(zhì)素和半纖維素的干擾，實驗效果好。
3．能分解纖維素的微生物屬于什么菌？為什么？
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的能水解纖維素的微生物有綠色木霉、變異青霉、黑曲霉、根霉等。它們都屬于霉菌。而不是細(xì)菌和酵母。這是因為“細(xì)菌吃葷，霉菌吃素”，也就是說，細(xì)菌多以蛋白質(zhì)水解物為它的能源，而霉菌多以糖或多糖水解產(chǎn)物為能源。而纖維素屬于多糖，因此，水解纖維素的多為霉菌。酵母由于一般不含纖維素酶、淀粉酶等，所以它只能利用單糖或二糖等作為碳源和能源。

題例領(lǐng)悟TILILINGWU

本實驗中選用卷煙紙為實驗材料，主要是為了獲得()
A．纖維素酶
B．纖維素
C．木質(zhì)素和半纖維素
D．能水解纖維素的微生物
解析：本題考查實驗材料的選擇原因。纖維素主要存在于木材、蘆葦、甘蔗等，主要用于造紙。卷煙紙中一般不含木質(zhì)素，但含纖維素。當(dāng)木質(zhì)素存在時會對纖維素酶產(chǎn)生干擾。因此，用卷煙紙可獲得纖維素，且無木質(zhì)素的干擾。
答案：B

酶發(fā)生作用是需要一定的條件的。不僅僅是溫度、pH等，其他物質(zhì)的存在也會降低酶的活力。如：木質(zhì)素就會降低纖維素酶的活動。
能水解纖維素的微生物是下列哪一組()
A．酵母菌、大腸桿菌
B．細(xì)菌、酵母菌
C．硝化細(xì)菌、病毒
D．霉菌
解析：酵母菌通常不含纖維素酶，只能利用單糖、雙糖等作物為碳源、能源。細(xì)菌多以蛋白質(zhì)水解物為它的能源，只有霉菌多以糖或多糖的水解產(chǎn)物為能源。所以它們能利用多糖，能水解纖維素。
答案：D

不同的微生物都需要碳源、能源。但由于遺傳差異，它們的碳源、能源各不相同。

隨堂訓(xùn)練SUITANGXUNLIAN

1細(xì)胞壁的主要成分是哪3種()
A．纖維素、半纖維素、木質(zhì)素
B．纖維素、淀粉、果膠
C．纖維素、木質(zhì)素、果膠
D．纖維素、半纖維素、淀粉
答案：A　解析：細(xì)胞壁的主要成分有3種，分別是纖維素、半纖維素、木質(zhì)素。
2目前已知的能水解纖維素的微生物是()
①細(xì)菌?、诓《尽、劢湍妇、苊咕、菽久埂、薷埂、呤删w?、嗪谇?br> A．①④　B．②③⑦
C．④⑤⑥⑧D．③④
答案：C　解析：能水解纖維素的微生物一般都含纖維素酶。這些微生物一般都是霉菌，即④⑤⑥⑧，而病毒及其他微生物則不能。

選修一生物2.1微生物的實驗室培養(yǎng)學(xué)案（人教版）

俗話說，居安思危，思則有備，有備無患。教師在教學(xué)前就要準(zhǔn)備好教案，做好充分的準(zhǔn)備。教案可以讓學(xué)生們能夠更好的找到學(xué)習(xí)的樂趣，減輕教師們在教學(xué)時的教學(xué)壓力。教案的內(nèi)容具體要怎樣寫呢？為此，小編從網(wǎng)絡(luò)上為大家精心整理了《選修一生物2.1微生物的實驗室培養(yǎng)學(xué)案（人教版）》，僅供您在工作和學(xué)習(xí)中參考。

選修一生物2.2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)學(xué)案（人教版）

俗話說，磨刀不誤砍柴工。教師要準(zhǔn)備好教案，這是教師需要精心準(zhǔn)備的。教案可以讓學(xué)生們能夠在上課時充分理解所教內(nèi)容，幫助教師能夠井然有序的進(jìn)行教學(xué)。關(guān)于好的教案要怎么樣去寫呢？下面的內(nèi)容是小編為大家整理的選修一生物2.2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)學(xué)案（人教版），歡迎大家閱讀，希望對大家有所幫助。

課題2　土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)

1．研究培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。
2．進(jìn)行微生物數(shù)量的測定。
一、研究思路
1．篩選菌株
尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)____肥，但不能直接被農(nóng)作物吸收利用，只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成____之后，才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成______。
（1）實驗室中微生物篩選的原理：人為提供有利于目的______生長的條件（包括營養(yǎng)、______、pH等），同時______或______其他微生物生長。
（2）選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，將允許________的微生物生長，同時______或______其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基。
2．統(tǒng)計菌落數(shù)目
（1）常用來統(tǒng)計樣品中______數(shù)目的方法是________。即當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的________。通過統(tǒng)計平板上的________，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在________的平板進(jìn)行計數(shù)。
統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目____。這是因為當(dāng)兩個或多個細(xì)胞在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。因此，統(tǒng)計結(jié)果一般用________來表示。
（2）____________也是測定微生物數(shù)量的常用方法。
（3）細(xì)菌的數(shù)目還可以通過______法來測定。例如，測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目，可將________的水過濾后，將濾膜放到________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)____色，可以根據(jù)培養(yǎng)基上________的數(shù)目，計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量。
3．設(shè)置對照
（1）設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中__________對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的________。
（2）對照實驗是指除了________的條件以外，其他條件都______的實驗，其作用是比照實驗組，排除任何其他可能原因的干擾，證明確實是所測試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。
二、實驗設(shè)計
實驗設(shè)計包括對實驗方案，所需儀器、材料，用具和藥品，具體的________以及時間安排等的綜合考慮和安排。關(guān)于土壤中某樣品細(xì)菌的分離與計數(shù)的實驗操作步驟如下：
1．土壤取樣
土壤中的微生物70%～90%是_____，絕大多數(shù)分布在距地表______的近____性土壤中。
2．樣品的稀釋
樣品的________將直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在________之間、適于計數(shù)的平板。測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量，一般選用____________倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)。第一次實驗時，可將稀釋范圍放寬一點，以保證能從中選擇出適于計數(shù)的平板。
3．微生物的培養(yǎng)與觀察
不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)______和培養(yǎng)______。細(xì)菌一般在30～37℃的溫度下培養(yǎng)1～2d，放線菌一般在25～28℃的溫度下培養(yǎng)5～7d，而霉菌一般在25～28℃的溫度下培養(yǎng)3～4d。
在菌落計數(shù)時，每隔24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目。選取____________時的記錄作為結(jié)果，以防止因____________而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。
一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間），同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。菌落的特征包括______________和______等方面。
思考：土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基”之稱，為什么？
三、操作提示
1．無菌操作
2．做好標(biāo)記
3．制定計劃
四、對分離得到的分解尿素的細(xì)菌的鑒定
1．在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的______將尿素分解成了____。氨會使培養(yǎng)基的堿性______，pH______。因此，可以通過檢測培養(yǎng)基____的變化來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。
2．在以______為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入______指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑將變____，說明該種細(xì)菌能夠________。

答案：一、1.氮　氨　脲酶　（1）菌株　溫度　抑制　阻止?。?）特定種類　抑制　阻止
2．（1）活菌　稀釋涂布平板法　一個活菌　菌落數(shù)　30～300　低　菌落數(shù)?。?）顯微鏡直接計數(shù)?。?）濾膜　已知體積　伊紅美藍(lán)　黑　黑色菌落
3．（1）非測試因素　可信度　（2）被測試　相同
二、實施步驟
1．細(xì)菌　3～8cm　中
2．稀釋程度　30～300　104、105、106
3．溫度　時間　菌落數(shù)目穩(wěn)定　培養(yǎng)時間不足　形狀、大小、隆起程度　顏色
思考：由于土壤具備了各種微生物生長所需的營養(yǎng)、水分、空氣、酸堿度、滲透壓和溫度等條件，是微生物生活的良好環(huán)境。
四、1.脲酶　氨　增強　升高　pH
2．尿素　酚紅　紅　分解尿素
1．培養(yǎng)基的類型及其應(yīng)用
標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基類型配制特點主要應(yīng)用
物理
性質(zhì)固體培養(yǎng)基加入瓊脂較多菌種分離，計數(shù)
半固體培養(yǎng)基加入瓊脂較少觀察微生物的運動、鑒定菌種
液體培養(yǎng)基不加入瓊脂工業(yè)生產(chǎn)，連續(xù)培養(yǎng)
化學(xué)
組成合成培養(yǎng)基由已知成分配制而成，培養(yǎng)基成分明確菌種分類、鑒定
天然培養(yǎng)基由天然成分配制而成，培養(yǎng)基成分不明確工業(yè)生產(chǎn)
目的
用途鑒別培養(yǎng)基添加某種指示劑或化學(xué)藥劑菌種的鑒別
選擇培養(yǎng)基添加（或缺少）某種化學(xué)成分菌種的分離
選擇培養(yǎng)基配制時可添加某種化學(xué)成分，這里的“添加”是在基本培養(yǎng)基的培養(yǎng)成分的基礎(chǔ)上加入的。配制固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基時加入的瓊脂是從紅藻中提取的，其主要成分是水溶性多糖，在配制培養(yǎng)基中作為凝固劑。
2．選擇培養(yǎng)基
一般來說，選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分，以抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長。如，加入青霉素可以抑制細(xì)菌、放線菌的生長，分離出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可抑制多種細(xì)菌的生長，但不影響金黃色葡萄球菌的生長，從而分離得到該菌。
培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分的缺少也可達(dá)到分離微生物的目的。如培養(yǎng)基中缺乏氮源時，可以分離固氮微生物，因為非固氮微生物不能在此培養(yǎng)基上生存。
當(dāng)培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時，也具有分離效果。如石油是唯一碳源時，可以抑制不能利用石油的微生物的生長，使能夠利用石油的微生物生存，達(dá)到分離能消除石油污染的微生物的目的。
生物適應(yīng)一定環(huán)境，環(huán)境對生物具有選擇作用。所以通過配制選擇培養(yǎng)基、控制培養(yǎng)條件等均可以選擇出目的微生物，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。
原則上只有目的微生物才能在選擇培養(yǎng)基上生長。但實際上，微生物培養(yǎng)是一個非常復(fù)雜的問題，有些微生物可以利用其他微生物的代謝產(chǎn)物生長繁殖，因此能夠在選擇培養(yǎng)基上生長的微生物是不是所需要的微生物，還需要進(jìn)一步的驗證。
3．顯微鏡直接計數(shù)法與稀釋涂布平板法的比較
顯微鏡直接計數(shù)法是利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)，是一種常用的微生物計數(shù)方法。此法是將經(jīng)過適當(dāng)稀釋的菌懸液放在血球計數(shù)板的載玻片與蓋玻片之間的計數(shù)室中，在顯微鏡下進(jìn)行計數(shù)。由于計數(shù)室的容積是一定的，所以可以根據(jù)在顯微鏡下觀察到的微生物數(shù)目來換算成單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)目。由于此法計得的是活菌和死菌的總和，故又稱為總菌計數(shù)法。此法的優(yōu)點是直觀、快速，但需要與血球計數(shù)板配套使用，且計數(shù)隨機性大，所以對菌體數(shù)量不能做出較為宏觀、全面的反映。
平板菌落計數(shù)法通常做梯度稀釋，所以計數(shù)的線性范圍大。由于是菌懸液涂布，所以比較均勻，能較好地反映菌落的疏密程度，重復(fù)性、平行性好，是經(jīng)典的計數(shù)方法。但需要平板上長出菌落一段時間后才能計數(shù)，因此速度慢是最大的缺點。
4．在土壤中采集菌樣的方法與要點
由于在土壤中幾乎可找到任何微生物，所以土壤往往是首選的采集目標(biāo)。土壤采樣必須考慮以下幾個問題：
（1）土壤中有機物的含量：有機物含量高，土質(zhì)較肥，一般在其中的微生物數(shù)量較多，反之微生物數(shù)量較少。
（2）采土的深度：土壤的深度不同，其通氣、養(yǎng)分和水分的分布情況也不同。表層的土壤直接受日光曝曬，故較干燥，微生物也不易大量繁殖。在離地面5～20cm處的土壤中，微生物含量最高。
（3）植被情況：植被的種類與微生物的分布有著密切的關(guān)系。例如，在冬天灌水的水稻田土壤中，真菌分布得較多。
（4）采土的季節(jié)：以春秋兩季為宜。這時土壤中的養(yǎng)分、水分和溫度都較適宜，微生物的數(shù)量也最多。采土?xí)r尤其應(yīng)注意土壤的含水量，水分過多會造成厭氧環(huán)境，不利于放線菌的生長繁殖。真菌雖需要較高的相對濕度，但基質(zhì)中的水分卻不宜過多。因此要避免在雨季采集土樣。此外，土壤的pH也應(yīng)適當(dāng)注意，細(xì)菌和放線菌在中性或微堿性土壤中居多，而真菌則在偏酸性的土壤中較豐富。
（5）采土方法：選擇好適當(dāng)?shù)攸c后，用小鏟子除去表土，取5～20cm處的土樣幾十克，盛入事先滅過菌的防水紙袋內(nèi)，并在上面記錄采土?xí)r間、地點和植被等情況。
5．實驗設(shè)計注意事項
（1）設(shè)置重復(fù)組。實驗要有足夠的次數(shù)，才能避免結(jié)果的偶然性，使結(jié)論更有說服力與準(zhǔn)確性。如該實驗中，可在每個稀釋度下設(shè)置3個選擇培養(yǎng)基平板；計數(shù)時在同一稀釋度下，至少對3個平板進(jìn)行重復(fù)計數(shù)，求平均值。這樣也可以為實驗是否成功提供參考，如重復(fù)組結(jié)果不一致，則意味著操作有誤，需要重新實驗。
（2）設(shè)置對照。對照的設(shè)置也會增加實驗結(jié)果的可信度和說服力。如在該實驗中，可在配制培養(yǎng)基時，準(zhǔn)備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基兩種，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照，用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，在相同的稀釋度下，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基的。另外，要設(shè)置空白對照，即在培養(yǎng)基中不加土樣，如果空白對照的培養(yǎng)基上沒有菌落生長，則說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。
題型一選擇培養(yǎng)基的特點與應(yīng)用
（2009上海高考）氯苯化合物是重要的有機化工原料，因其不易降解，會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實驗方案（圖1）篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培養(yǎng)基配方如下表。
圖1
培養(yǎng)基的組成
液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機鹽（無碳）蒸餾水
Ⅰ號10g5g5mg5g——1L
Ⅱ號——50mg5g3g適量1L
Ⅲ號——20～80mg5g3g適量1L
（1）配制Ⅱ號固體培養(yǎng)基時，除添加Ⅱ號培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的________。
（2）培養(yǎng)基配制時，滅菌與調(diào)pH的先后順序是________________________________
________________________________________________。
（3）從用途上來說，Ⅰ號培養(yǎng)基和Ⅱ號培養(yǎng)基分別屬于________培養(yǎng)基和________培養(yǎng)基。在Ⅱ號培養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成分是________。
（4）在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時，SP1的菌體會變成一個圓形的休眠體，這種休眠體被稱為________。
（5）將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的Ⅲ號培養(yǎng)液中培養(yǎng)，得到生長曲線（如圖2）。從圖2可知，SP1菌在________培養(yǎng)條件下最早停止生長，其原因是____________________
_____________________________________________________________________________。
圖2
解析：（1）固體培養(yǎng)基必須含有適量的瓊脂。（2）配制培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)pH后滅菌。（3）Ⅰ號培養(yǎng)基是為了獲得更多的菌株，屬于通用培養(yǎng)基，Ⅱ號培養(yǎng)基是為了選擇出SP1菌株，屬于選擇培養(yǎng)基，Ⅱ號培養(yǎng)基成分中含N物質(zhì)為硝酸銨，則應(yīng)由它為SP1菌株提供氮源。（4）在惡劣環(huán)境下一些菌體會形成芽孢休眠體，來度過不良環(huán)境。（5）SP1菌株是以氯苯為碳源，當(dāng)氯苯消耗盡菌株因缺少碳源而不能繼續(xù)生存，故氯苯含量越少，SP1菌株越早停止生長。
答案：（1）瓊脂?。?）先調(diào)pH，后滅菌?。?）通用　選擇　硝酸銨?。?）芽孢?。?）20mgL－1氯苯　碳源最早耗盡
題型二測定細(xì)菌數(shù)量的原理與方法
用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，正確的是（）。
A．涂布了1個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230
B．涂布了2個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是215和260，取平均值238
C．涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、212和256，取平均值163
D．涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、240和250，取平均值233
解析：在設(shè)計實驗時，一定要涂布至少3個平板，作為重復(fù)組，才能增強實驗的說服力與準(zhǔn)確性，所以A、B兩項不正確。C項雖涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠(yuǎn)，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地用3個平板的計數(shù)值求平均值。
答案：D
反思領(lǐng)悟：在設(shè)計實驗時，一定要涂布至少3個平板作為重復(fù)組；在分析實驗結(jié)果時，一定要考慮所設(shè)置的重復(fù)組的結(jié)果是否一致，如果結(jié)果差別過大，則意味著操作有誤，需重新實驗。
題型三設(shè)計微生物的選擇方案
用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置的對照是（）。
A．未接種的選擇培養(yǎng)基B．未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
C．接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D．接種了的選擇培養(yǎng)基
解析：將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此，以牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照。對照遵循的是單一變量原則，所以與選擇培養(yǎng)基一樣接種、培養(yǎng)。
答案：C
反思領(lǐng)悟：對照實驗是指除了被測試的條件以外，其他條件都相同的實驗，其作用是比照實驗組，排除任何其他可能原因的干擾，證明確實是所測試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。
1．下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實驗操作的敘述，其中錯誤的是（）。
A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上
C．將實驗組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24～48h
D．確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進(jìn)行計數(shù)
2．若大腸桿菌和圓褐固氮菌混合在一起，采用下列哪組培養(yǎng)基可將它們分離？（）
A．加食鹽的培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基B．伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基和無氮培養(yǎng)基
C．斜面培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基D．加青霉素的培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基
3．分析下面培養(yǎng)基的配方，回答下面的問題。
KH2PO41.4g
Na2HPO42.1g
MgSO47H2O0.2g
葡萄糖10.0g
尿素1.0g
瓊脂15.0g
用蒸餾水定容到1000mL
（1）在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是________和________。
（2）按物理性質(zhì)劃分該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，理由是培養(yǎng)基中含有________；該類培養(yǎng)基常用于微生物的純化、________和________。
（3）由于培養(yǎng)基中只有尿素一種______源，所以該培養(yǎng)基只能用于能夠合成________的微生物的培養(yǎng)。用此培養(yǎng)基培養(yǎng)土壤浸出液能夠從土壤中篩選出________細(xì)菌。
（4）在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，并能抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱作________培養(yǎng)基。
4．（2011課標(biāo)全國理綜）有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?；卮鹣铝袉栴}。
（1）在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。
（2）純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即________和________。
（3）為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力________________________________________________________________________。
（4）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、________和________。無菌技術(shù)要求實驗操作應(yīng)在酒精燈________附近進(jìn)行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。

答案：1．D　檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)，用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上，將實驗組和對照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24～48h，在確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的一組平板為代表進(jìn)行計數(shù)。
2．B　大腸桿菌的代謝產(chǎn)物可與伊紅美藍(lán)結(jié)合，使菌落呈黑色，圓褐固氮菌能自行固氮，可用無氮培養(yǎng)基選擇。
3．解析：（1）碳源是提供碳元素的物質(zhì)，氮源是提供氮元素的物質(zhì)。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。（2）根據(jù)物理性質(zhì)可以將培養(yǎng)基分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中添加了瓊脂作凝固劑，常用于微生物的純化、分離和計數(shù)。（3）絕大多數(shù)生物都能利用葡萄糖，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以此培養(yǎng)基對微生物有選擇作用，選擇對象是能夠利用尿素的微生物。
答案：（1）葡萄糖　尿素　（2）固體　凝固劑瓊脂　分離　計數(shù)?。?）氮　脲酶　分解尿素的　（4）選擇
4．解析：（1）要獲得分解原油的細(xì)菌，應(yīng)選擇以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基，以保證這種細(xì)菌可以大量繁殖，而其他細(xì)菌不能生存。此種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。
（2）純化菌種常用平板劃線法和稀釋涂布平板法。
（3）在以原油為唯一碳源的培養(yǎng)基上，在菌落周圍的原油被分解而形成分解圈，分解圈越大，說明該菌株降解能力越強。
（4）實驗室滅菌有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，實驗操作要在酒精燈火焰附近的無菌區(qū)進(jìn)行。
答案：（1）原油　選擇?。?）平板劃線法　稀釋涂布平板法　（3）強?。?）干熱滅菌　高壓蒸汽滅菌　火焰